兔抗PPP6C抗体亲和纯化，灵活稀释，适用于不同丰度样本及细胞周期研究

产品概述

本品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的针对PPP6C（蛋白磷酸酶6催化亚基）的兔多克隆抗体，货号A300-844A。该抗体可识别人及小鼠来源的PPP6C，适用于免疫沉淀（IP）和蛋白质印迹（WB）检测。抗体经抗原亲和纯化，浓度高达1000 ?g/ml，为细胞周期调控及NF-κB信号通路研究提供了高灵敏度、高特异性的检测工具。

核心规格参数

项目 | 详细信息

靶点 | PPP6C

反应性 | 小鼠、人

应用 | IP, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第255位至C末端（第305位）区域

亚型 | IgG

偶联物 | 非偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原物种 | 人

浓度 | 1000 ?g/ml

保存条件 | 2 - 8 °C

有效期 | 收货之日起1年

缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液，pH 7-8，含0.09%叠氮化钠

应用方法与推荐稀释度

蛋白质印迹（WB）

所有WB实验使用含5%脱脂牛奶的TBST作为封闭液及抗体稀释液。一抗孵育条件为过夜孵育。

细胞裂解液WB：使用山羊抗兔IgG重链和轻链抗体（货号A120-101P）作为二抗。

免疫沉淀产物WB：使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体，封闭液中需添加5%正常猪血清（货号S100-020）以降低轻链非特异性信号。

推荐稀释度：1:1000 - 1:10,000

免疫沉淀（IP）

推荐用量：6 ?g 抗体 / mg 细胞裂解液

操作要点：

1. 将6 ?g抗体与含1 mg蛋白的细胞裂解液混合

2. 4°C孵育1-2小时或过夜

3. 加入蛋白A/G琼脂糖珠，继续孵育1-2小时

4. 充分洗涤沉淀复合物（建议4-5次）

5. 使用SDS上样缓冲液洗脱，煮沸变性后进行WB检测

产品背景信息

蛋白功能概述

PPP6C（蛋白磷酸酶6催化亚基）是丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶大家族（PPP家族）的成员之一，属于2A型磷酸酶，在结构上与PP2A和PP4密切相关。PPP6C作为催化亚基，通常与不同的调节亚基形成全酶复合物，靶向特定的底物和细胞区室。

分子机制与生理功能

1. 细胞周期调控：PPP6C通过调控细胞周期蛋白D1（cyclin D1）的稳定性参与细胞周期进程。研究表明，PP6磷酸酶活性可去磷酸化cyclin D1，影响其在G1期的积累和降解，从而控制细胞增殖。

2. NF-κB信号通路的负调控：PPP6C参与NF-κB和TAK1活化的负向控制。TAK1（转化生长因子β活化激酶1）是NF-κB和MAPK通路的上游激酶，PPP6C可通过去磷酸化TAK1或其相关信号分子来限制炎症反应的过度激活。

3. 其他功能：PP6还参与DNA损伤应答、mRNA剪接和细胞骨架调节等过程。

储存与稳定性注意事项

1. 保存温度：2-8°C，请勿冷冻。反复冻融会导致蛋白磷酸酶抗体变性及活性损失。

2. 有效期：收货之日起1年内稳定。

3. 防腐剂：缓冲液中含有0.09%叠氮化钠，使用时应遵守实验室安全规范。

4. 分装建议：由于抗体浓度为1000 ?g/ml，可根据实验频率分装成小份（如20-50 ?l/管），仍保存于2-8°C，避免冷冻。

功能性优势总结

1. 超高浓度（1000 ?g/ml）：提供充足的抗体总量，适合大规模或长期系列实验；高浓度有助于IP实验中高效捕获低丰度PPP6C复合物。

2. C末端靶向表位（250-305）：该区域为PPP6C催化亚基特有的C端延伸部分，与调节亚基结合及底物识别相关；抗体特异性识别人和小鼠PPP6C，不与其他PPP家族成员（如PP2A、PP4）发生显著交叉反应。

3. 宽WB稀释范围（1:1000-1:10,000）：提供极大实验灵活性，可根据不同细胞系或组织中PPP6C的表达丰度调整抗体用量。

4. 亲和纯化+高纯度：抗原亲和纯化确保抗体特异性，降低WB背景和IP非特异性沉淀。

5. IP-WB一体化方案：配套抗轻链HRP二抗及猪血清封闭建议，有效消除沉淀中重链干扰，便于检测PPP6C与调节亚基的共沉淀。