一、产品概述
BLM(Bloom综合征蛋白)是一种RecQ家族DNA解旋酶,在DNA复制与修复过程中发挥关键作用。BLM基因突变或功能失活可导致Bloom综合征,临床表现为侏儒症、不孕、红斑、学习障碍、免疫缺陷及癌症易感性。研究表明,BLM参与构成BRCA1相关基因组监视复合体(BASC),该复合体包含BRCA1、MSH2、MSH6、MLH1、ATM、PMS2及RAD50-MRE11-NBS1蛋白复合物。
由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的本文介绍的兔抗BLM抗体亲和纯化(货号A300-110A)由美国生产,经抗原亲和纯化,适用于小鼠及人源样本的免疫沉淀(IP)和免疫印迹(WB)检测。
二、核心规格参数
参数 | 详细信
靶标 | BLM(Bloom综合征蛋白)
反应性 | 小鼠,人
宿主 | 兔
克隆性 | 多克隆
形式 | 全IgG
免疫原 | 人BLM蛋白第1367位氨基酸至C末端区间
同型 | IgG
标记 | 非偶联
纯度 | 抗原亲和纯化
抗原物种 | 人
浓度 | 1000 ug/ml
储存条件 | 2 - 8 °C
保质期 | 收货后1年
缓冲液 | Tris-柠檬酸盐/磷酸盐缓冲液,pH 7-8,含0.09%叠氮化钠
免疫原与识别表位
本抗体采用针对BLM蛋白表位特异性的亲和纯化方法制备。具体而言,将识别表位固定在固相支持物上,从抗血清中亲和捕获特异性抗体。
A300-110A所识别的表位位于人Bloom综合征蛋白第1375位残基至C末端(第1417位残基)之间。编号依据NCBI参考序列NP_000048.1(GeneID 641)。
三、浓度测定方法
免疫球蛋白浓度采用比尔定律测定,其中1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光度(A280)为1.4。
应用与实验条件
通用说明
所有免疫印迹实验均采用5%脱脂牛奶-TBST作为封闭液及抗体稀释液。一抗孵育条件为过夜孵育。
推荐稀释比例
应用 | 推荐稀释比例/用量
免疫沉淀(IP) | 6 ug/mg 裂解物
免疫印迹(WB) | 1:2000 - 1:10000
二抗选择说明
细胞裂解物免疫印迹:
使用山羊抗兔IgG重链和轻链抗体(货号A120-101P)。
免疫沉淀产物的免疫印迹:
使用抗兔IgG轻链HRP偶联抗体,并在封闭缓冲液中添加5%正常猪血清(货号S100-020)。这一设计可有效避免免疫沉淀中变性释放的重链和轻链信号干扰目标蛋白检测。
四、产品使用与储存
储存注意事项
抗体应储存于2 - 8°C。缓冲液中含有0.09%叠氮化钠作为防腐剂,请勿冷冻,以免反复冻融导致抗体活性下降。
质量控制
每批次产品均经过抗原亲和纯化验证,确保抗体特异性。生产过程中使用固定于固相支持物上的BLM特异性表位进行纯化。
五、应用要点总结
1. 免疫沉淀:每mg细胞裂解物使用6 ug抗体,可有效富集BLM蛋白及其相互作用复合物。
2. 免疫印迹:推荐稀释范围1:2000至1:10000,建议根据具体样本类型和表达水平进行梯度预实验确定最佳稀释度。
3. 交叉反应性:经验证可识别小鼠和人源BLM蛋白,适用于跨物种研究。
4. 表位定位:抗体识别C末端区域(1375-1417位氨基酸),该区域在BLM功能调控中具有重要作用。
本抗体为研究BLM在DNA复制、修复及基因组稳定性维持中的功能提供了可靠工具,适用于癌症发生机制、Bloom综合征病理研究及药物靶点验证等实验场景。

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