亲和纯化兔抗BLM多克隆抗体，助力DNA损伤修复通路解析

1. 产品概述

由艾美捷代理Bethyl推出的兔抗BLM多克隆抗体（亲和纯化）（货号：A300-110A），经抗原亲和纯化获得，特异性识别人源BLM蛋白（Bloom综合征蛋白）。抗体靶向BLM蛋白C末端第1375至1417位氨基酸区域，适用于免疫沉淀（IP）及蛋白质印迹（WB）等应用，是研究DNA复制、修复及基因组稳定性维持机制的重要工具。

2. 核心规格参数

项目 | 规格详情

靶标 | BLM（Bloom综合征蛋白）

验证反应种属 | 人，小鼠

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

抗体形式 | 完整IgG分子

免疫原表位 | 人BLM蛋白C末端区域，位于第1375位至终止端（第1417位）之间（参照NP_000048.1）

亚型 | IgG

标记物 | 无标记（非偶联）

纯度 | 抗原亲和纯化

浓度 | 1000 ug/mL（1 mg/mL）

缓冲液体系 | Tris-柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液，pH 7–8，含0.09%叠氮化钠

储存条件 | 2 – 8 °C（请勿冷冻）

保质期 | 自收货之日起1年

3. 产品制备与质控

纯化工艺：采用固相载体固定BLM特异性表位肽段，进行亲和层析纯化，确保仅富集识别目标区域的高亲和力抗体。

表位定位：本抗体（货号A300-110A）识别的表位位于人BLM蛋白第1375位至C末端（第1417位）之间（参考NP_000048.1及GeneID 641）。

浓度测定：免疫球蛋白浓度依据比尔-朗伯定律测定，其中1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光值（A280）为1.4。

4. 推荐工作稀释度

以下稀释度基于标准实验条件确立，具体用量需根据样品类型及实验体系进一步优化：

应用方法 | 推荐稀释度/用量 | 备注

Western Blot（WB） | 1:2,000 – 1:10,000 | 使用5% Milk-TBST作为封闭液和抗体稀释液，一抗孵育过夜。检测细胞裂解物时推荐使用抗兔IgG H&L链二抗（如A120-101P）。

Immunoprecipitation（IP） | 6 ug/mg 裂解物 | 免疫沉淀后WB检测时，建议使用抗兔IgG轻链HRP标记二抗，并在封闭液中添加5%正常猪血清（Cat. No. S100-020）以消除重链干扰。

5. 靶标生物学背景

BLM（Bloom综合征蛋白）属于RecQ DNA解旋酶家族，在DNA复制、重组及修复过程中发挥关键作用。其核心功能包括：

解旋酶活性：BLM能够解开多种DNA结构，包括Holliday junction、G-四链体（G4）及复制叉中间体，防止复制叉停滞和基因组不稳定。

基因组监视复合物（BASC）：BLM与BRCA1、MSH2、MSH6、MLH1、ATM、PMS2及RAD50-MRE11-NBS1复合物共同构成BASC复合体，参与DNA损伤感应与修复协调。

临床相关性：BLM基因突变导致Bloom综合征，这是一种常染色体隐性遗传病，临床表现包括身材矮小、面部红斑、免疫缺陷、不育及显著的癌症易感性（尤以白血病和淋巴瘤多见）。BLM功能缺失导致姐妹染色单体交换（SCE）频率显著升高，是该疾病的细胞学标志。本抗体可有效检测内源性BLM蛋白水平及迁移变化，适用于DNA损伤修复、肿瘤发生机制及遗传疾病相关研究。

6. 使用与储存注意事项

1. 储存：请于 2–8 °C 避光保存。切勿冷冻，以免抗体变性或聚合。

2. 稳定性：在推荐储存条件下，自收货之日起1年内稳定有效。

3. 防腐剂提示：缓冲液含0.09%叠氮化钠，对呼吸系统及黏膜有刺激性，操作时请穿戴适当防护装备。若需进行抗体偶联标记，请预先透析去除叠氮化钠。

4. 种属交叉性：已验证可识别人及小鼠来源的BLM。用于其他种属时建议预先验证。

5. 信号检测建议：BLM分子量较大（约159 kDa），建议使用低浓度SDS-PAGE凝胶（6-8%）进行电泳分离，并适当延长转膜时间以确保高分子量蛋白充分转移。

*本说明书仅供研究使用，不适用于诊断或治疗程序。