1. 产品概述
由艾美捷代理Bethyl推出的兔抗磷酸化SMC1 (Ser966) 多克隆抗体(货号:A300-050A),经抗原亲和纯化获得,特异性识别人源SMC1(Structural Maintenance of Chromosomes 1)蛋白在第966位丝氨酸(Ser966)位点发生磷酸化的修饰形式。该抗体为研究DNA损伤应答、细胞周期检查点及染色体稳定性等关键生物学过程提供了高特异性工具。
2. 核心规格参数
项目 | 规格详情
靶标| 磷酸化SMC1(Ser966位点)
验证反应种属| 人
宿主| 兔
克隆性| 多克隆
抗体形式| 完整IgG分子
免疫原| 围绕人SMC1 Ser966位点的磷酸化合成多肽(参照NP_006297.2编号)
亚型| IgG |
标记物| 无标记(非偶联)
纯度| 抗原亲和纯化
浓度| 1000 ug/mL(1 mg/mL)
缓冲液体系| Tris-柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液,pH 7–8,含0.09%叠氮化钠
储存条件| 2 – 8 °C(请勿冷冻)
保质期| 自收货之日起1年
3. 产品制备与质控
纯化工艺:采用固相载体固定磷酸化SMC1(Ser966)特异性表位,进行亲和层析纯化,确保仅富集识别该磷酸化修饰状态的高亲和力抗体。
免疫原设计:免疫原为人工合成的磷酸化多肽,对应人SMC1蛋白(GeneID 8243)第966位丝氨酸及其周边序列(参考NP_006297.2)。
浓度测定:免疫球蛋白浓度依据比尔-朗伯定律测定,其中1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光值(A280)为1.4。
4. 推荐工作稀释度
以下稀释度基于标准实验条件确立,具体用量需根据样品类型及实验体系进一步优化:
应用方法 | 推荐稀释度/用量 | 备注
Western Blot(WB)| 1:2,000 – 1:10,000 | 使用5% Milk-TBST作为封闭液和抗体稀释液,一抗孵育过夜。检测细胞裂解物时推荐使用抗兔IgG H&L链二抗(如A120-101P)。
Immunohistochemistry(IHC)| 1:1,000 – 1:5,000 | 推荐使用柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0)进行抗原修复(适用于FFPE组织切片)。
Immunocytochemistry-IF(ICC-IF)| 1:500 – 1:5,000 | 推荐甲醛固定,Triton-X 100透化处理。
Immunoprecipitation(IP)| 6 ug/mg 裂解物 | 免疫沉淀后WB检测时,建议使用抗兔IgG轻链HRP标记二抗,并在封闭液中添加5%正常猪血清(Cat. No. S100-020)以消除重链干扰。
5. 靶标生物学背景
SMC1(染色体结构维持蛋白1)是黏连蛋白(Cohesin)复合物的核心组分之一。Cohesin复合物由SMC1与SMC3形成异二聚体,构成环状结构,负责在细胞分裂过程中维持姐妹染色单体的黏连,确保染色体在有丝分裂和减数分裂中的正确分离与分配。
Ser966磷酸化的生物学意义:
在DNA双链断裂(DSB)发生后,共济失调毛细血管扩张突变激酶(ATM)被激活,进而磷酸化SMC1的Ser966位点。该磷酸化事件是ATM介导DNA损伤检查点信号通路中的关键节点,参与调控细胞周期阻滞及DNA损伤修复。
SMC1 Ser966磷酸化水平常用于监测ATM信号通路的激活状态,是研究基因组稳定性维持机制、肿瘤放射敏感性及DNA损伤修复缺陷的重要生物标志物。
6. 使用与储存注意事项
1. 储存:请于 2–8 °C 避光保存。切勿冷冻,以免抗体变性或聚合。
2. 稳定性:在推荐储存条件下,自收货之日起1年内稳定有效。
3. 防腐剂提示:缓冲液含0.09%叠氮化钠,对呼吸系统及黏膜有刺激性,操作时请穿戴适当防护装备。若需进行抗体偶联标记,请预先透析去除叠氮化钠。
4. 磷酸化特异性提示:本抗体经磷酸化表位亲和纯化,对非磷酸化SMC1及同家族其他蛋白(如SMC3)的交叉反应极低。建议在实验中设置磷酸酶处理或相应磷酸化诱导/抑制对照以验证信号特异性。
5. 种属适用性:已验证可识别人源SMC1。用于其他物种时建议预先验证,因磷酸化位点序列在不同物种间可能存在差异。
*本说明书仅供研究使用,不适用于诊断或治疗程序。

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