兔抗MED12多克隆抗体，双种属认证，覆盖突变热点区域检测

1. 产品概述

由艾美捷代理Bethyl推出的兔抗MED12多克隆抗体（货号：A300-774A），经抗原亲和纯化获得，特异性识别人源MED12蛋白（Mediator Complex Subunit 12）。抗体靶向MED12蛋白C末端第2127至2177位氨基酸区域，适用于免疫组化（IHC）、免疫沉淀（IP）及蛋白质印迹（WB）等多种应用，是研究转录调控、Wnt信号通路及中介体复合物功能的重要工具。

2. 核心规格参数

项目 | 规格详情

靶标| MED12（中介体复合物亚基12）

验证反应种属| 人，小鼠

宿主| 兔

克隆性| 多克隆

抗体形式| 完整IgG分子

免疫原表位| 人MED12蛋白C末端区域，位于第2127位至终止端（第2177位）之间（参照NP_005111.2）

亚型| IgG

标记物| 无标记（非偶联）

纯度| 抗原亲和纯化

浓度| 1000 ug/mL（1 mg/mL）

缓冲液体系| Tris-柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液，pH 7–8，含0.09%叠氮化钠

储存条件| 2 – 8 °C（请勿冷冻）

保质期| 自收货之日起1年

3. 产品制备与质控

纯化工艺：采用固相载体固定MED12特异性表位肽段，进行亲和层析纯化，确保仅富集识别目标区域的高亲和力抗体。

表位定位：本抗体（货号A300-774A）识别的表位位于人MED12蛋白第2127位至C末端（第2177位）之间（参考NP_005111.2及GeneID 9968）。

浓度测定：免疫球蛋白浓度依据比尔-朗伯定律测定，其中1 mg/mL IgG在280 nm波长处的吸光值（A280）为1.4。

4. 推荐工作稀释度

以下稀释度基于标准实验条件确立，具体用量需根据样品类型及实验体系进一步优化：

应用方法 | 推荐稀释度/用量 | 备注

Western Blot（WB）| 1:2,000 – 1:10,000 推荐使用3-8% Tris-醋酸凝胶进行电泳分离，以获得高分子量蛋白的最佳分辨效果。使用5% Milk-TBST作为封闭液和抗体稀释液，一抗孵育过夜。

Immunohistochemistry（IHC）| 1:1,000 – 1:5,000 | 推荐使用柠檬酸盐缓冲液（pH 6.0）进行抗原修复（适用于FFPE组织切片）。

Immunoprecipitation（IP）| 6 ug/mg 裂解物 | 免疫沉淀后WB检测时，建议使用抗兔IgG轻链HRP标记二抗，并在封闭液中添加5%正常猪血清（Cat. No. S100-020）以消除重链干扰。

5. 靶标生物学背景

MED12是中介体复合物（Mediator Complex）的核心亚基之一。中介体复合物由约30个亚基组成，是RNA聚合酶II（Pol II）转录装置与基因特异性转录因子之间的关键衔接平台，在真核基因转录调控中处于核心枢纽地位。

MED12的功能角色：

转录共激活：中介体复合物最初作为甲状腺激素受体的共激活因子被发现，随后证实其参与多种转录因子的共激活过程。MED12在此复合物中发挥结构和调控双重作用。

Wnt信号通路：MED12与β-catenin的直接相互作用是Wnt信号依赖性转录所必需的。该信号通路在胚胎发育、组织稳态及肿瘤发生中具有高度保守的重要功能，MED12因此成为Wnt/β-catenin信号传导的关键调控节点。

临床相关性：MED12基因突变与多种人类疾病相关联，包括X连锁的Opitz-Kaveggia综合征（FGS1）、Ohdo综合征以及子宫平滑肌瘤等。MED12在多种肿瘤中亦存在功能获得性或丧失性突变，影响转录程序及细胞命运决定。本抗体可有效检测内源性MED12蛋白水平及分布，适用于转录调控机制、信号转导通路及疾病模型相关研究。

6. 使用与储存注意事项

1. 储存：请于 2–8 °C 避光保存。切勿冷冻，以免抗体变性或聚合。

2. 稳定性：在推荐储存条件下，自收货之日起1年内稳定有效。

3. 防腐剂提示：缓冲液含0.09%叠氮化钠，对呼吸系统及黏膜有刺激性，操作时请穿戴适当防护装备。若需进行抗体偶联标记，请预先透析去除叠氮化钠。

4. WB凝胶选择：MED12分子量较大（约217 kDa），建议使用3-8% Tris-醋酸梯度凝胶替代传统Tris-甘氨酸凝胶，可显著提高高分子量蛋白的分离效率及条带清晰度。转膜条件需适当延长（建议湿转，300-400 mA恒流，2-3小时）。

5. 种属交叉性：已验证可识别人及小鼠来源的MED12。用于其他种属时建议预先验证。

*本说明书仅供研究使用，不适用于诊断或治疗程序。