山羊抗Myc标签抗体亲和纯化，兼容鼠/兔源多色检测体系方案

产品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的Myc Tag抗体（山羊源）（货号：A190-104A）是一种亲和纯化的多克隆抗体，特异性识别人c-Myc蛋白表位标签（氨基酸残基410-419：EQKLISEEDL）。该抗体以全IgG形式提供，浓度为1 mg/ml，经固相亲和层析纯化，未偶联标记物。产品适用于酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫细胞化学（ICC）、免疫沉淀（IP）和Western Blot（WB）等多种检测场景，是重组蛋白表达分析中广泛使用的工具抗体。

免疫原与特异性

本抗体的免疫原为一段合成肽，对应人c-Myc蛋白第410至419位氨基酸残基（序列：EQKLISEEDL），该肽段与钥孔血蓝蛋白（KLH）偶联后用于免疫山羊。通过将该合成肽固定于固相载体，采用亲和层析技术从免疫血清中分离纯化抗体，确保高特异性识别Myc表位。

Myc标签是蛋白工程中最常用的表位标签之一，可被融合至目标蛋白的N端或C端。本抗体适用于检测带有c-Myc标签（EQKLISEEDL）的重组蛋白，能够识别天然构象或变性条件下的标签序列。

技术参数

参数 | 详细信息

靶标 | Myc Tag (c-myc表位，410-419)

反应性 | 通过融合蛋白识别人源表位序列

应用 | ELISA、ICC、IP、WB

宿主 | 山羊

克隆性 | 多克隆

形式 | 全IgG

同型 | IgG

偶联物 | 未偶联

纯度 | 抗原亲和纯化

抗原种属 | 人

浓度 | 1 mg/ml

储存条件 | 2–8 °C

保质期 | 收货后1年

缓冲液 | 磷酸盐缓冲液（PBS），含0.09%叠氮化钠

浓度测定方法

免疫球蛋白浓度采用比尔定律测定，其中1 mg/ml IgG在280 nm波长下的吸光度（A280）为1.4。

实验方案

重要提示

并非所有列出的应用都已由我们的实验室进行明确验证。用户应根据自身实验体系进行优化和验证。以下稀释度和用量为通用推荐范围，实际条件可能需要调整。

Western Blot (WB)

推荐稀释度：1:1,000 – 1:30,000

封闭及稀释液：5%脱脂牛奶-TBST

一抗孵育：过夜孵育（4°C）

二抗：驴抗山羊IgG重链和轻链抗体（货号A50-101P）

免疫沉淀 (IP)

推荐用量：1–4 ?g抗体/mg细胞裂解物

备注：对于高表达的Myc标签蛋白，可使用较低用量（1 ?g/mg）；对于低表达水平样本，可增加至4 ?g/mg。建议预先评估目标蛋白丰度。

酶联免疫吸附测定 (ELISA)

检测稀释度：1:1,000 – 1:30,000

包被稀释度：1:100 – 1:500（用于包被ELISA板）

免疫细胞化学 (ICC)

推荐稀释度：1:100 – 1:400

固定方案：推荐使用4%多聚甲醛固定细胞，然后用0.1% Triton X-100透化（如检测胞内标签）。具体条件需根据细胞类型优化。

靶点背景信息

Myc标签简介

c-Myc是一种转录因子，参与细胞增殖、分化和凋亡调控。其C端含有一段高度保守的短肽序列（第410–419位：EQKLISEEDL），被称为Myc表位。该表位被广泛用作重组蛋白的融合标签，原因如下：

分子量小：仅10个氨基酸，对目标蛋白的结构和功能影响极小。

通用性强：有大量高质量商业抗体可供选择，便于检测和免疫沉淀。

灵活性高：可融合至目标蛋白的N端或C端，且不影响大多数蛋白的天然折叠。

检测灵敏度高：Myc标签抗体通常具有高亲和力，可检测低丰度表达蛋白。

应用场景

带有Myc标签的重组蛋白广泛应用于以下领域：

蛋白表达验证：通过WB或ICC确认转染细胞中目标蛋白的表达及亚细胞定位。

蛋白-蛋白相互作用：利用Myc标签抗体进行免疫共沉淀（Co-IP），捕获Myc标签融合蛋白及其结合伙伴。

蛋白纯化：Myc标签可用于亲和层析纯化（需固定Myc抗体或肽段），并在温和条件下采用竞争性肽段洗脱。

定量检测：通过ELISA对带有Myc标签的抗原或抗体进行定量分析。

产品优势与功能特点

1. 宿主选择优势（山羊源）：与传统兔源或小鼠源Myc抗体相比，山羊源抗体在多重染色或多重免疫沉淀中具有优势，可与其他鼠源或兔源抗体兼容，避免宿主交叉干扰。尤其在免疫沉淀后WB检测中，若使用山羊源一抗，可选用相应的驴抗山羊二抗，避免与小鼠或兔源IP抗体重链产生交叉。

2. 超高稀释比范围（WB 1:1,000–1:30,000；ELISA 1:1,000–1:30,000）：高亲和力保证了极低用量即可获得强信号，1 mg/ml浓度配合宽稀释范围，单支抗体可支持大量检测，经济性显著。

3. 亲和纯化工艺：采用Myc表位肽段固相亲和层析，相比蛋白A/G纯化，抗原特异性更高，非特异性背景更低，尤其适用于IP和ICC等需要低背景的应用。

4. 广泛的应用兼容性：抗体在ELISA（包被与检测）、ICC、IP和WB中均有推荐起始条件，覆盖了标签蛋白检测的主要技术平台，用户无需为不同实验购买不同抗体。

5. 稳定储存配方：PBS缓冲液（pH 7.4）配合0.09%叠氮化钠防腐剂，2–8°C下稳定保存1年。无需冷冻，避免反复冻融导致的抗体聚集和活性下降。

6. 明确的质量控制：基于比尔定律的A280定量，确保批次间浓度一致性。生产过程中使用KLH偶联免疫原，并经肽段亲和纯化，抗体纯度及特异性有保障。