山羊抗禽IgG重链和轻链抗体亲和纯化，高纯度统一检测多种禽类样本

产品概述

本品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊源抗鸟类免疫球蛋白G（IgG）重链和轻链多克隆抗体（货号：A140-110P），经抗原亲和纯化，以未标记形式提供。该抗体通过多种鸟类（鸽、鸭、麻雀、鸡）纯化IgG免疫诱导产生，可识别鸟类IgG的完整分子（包括重链和轻链），覆盖至少10种常见鸟类物种。适用于酶联免疫吸附测定、免疫细胞化学、免疫组织化学及免疫印迹等多种检测体系，是禽类免疫学研究、鸟类疾病监测及抗体药物开发中重要的检测工具。

基本规格参数

参数 具体信息

靶标 鸟类IgG重链和轻链

反应种属 鸟类

宿主 山羊

克隆性 多克隆

形式 全IgG

自身抗体亚型 IgG

标记物 未标记

纯度 抗原亲和纯化

抗原种属 鸟类

浓度 1 mg/ml

保存温度 2 - 8 °C

有效期 自收货之日起2年

缓冲液 含0.09%叠氮钠的磷酸盐缓冲盐水

生产与纯化工艺

本抗体的生产采用多物种免疫原策略。具体流程如下：

1. 免疫原制备：从鸽、鸭、麻雀和鸡的血清中分别纯化IgG，混合后作为免疫原。

2. 免疫程序：使用上述混合抗原对山羊进行多次免疫，诱导产生广谱识别鸟类IgG的抗血清。

3. 亲和纯化：将抗原（混合鸟类IgG）偶联至琼脂糖凝胶珠，通过亲和层析从抗血清中特异性分离目标抗体。

4. 浓度测定：依据比尔定律，1 mg/ml IgG在280 nm波长下的吸光度（A280）为1.4。本品最终浓度为1 mg/ml，即用型设计。

该多物种免疫策略确保了抗体对多种鸟类IgG的广谱识别能力，同时保留了亲和纯化的高纯度特性。

特异性验证

经免疫电泳和酶联免疫吸附测定验证，本抗体对以下鸟类IgG具有特异性反应：

经验证明确识别的物种 可检测的物种（经文献或内部验证）

鸭、麻雀、鸽、鸡 火鸡、鸵鸟、鸸鹋、鹌鹑、金刚鹦鹉、鸡尾鹦鹉

关键特性：

不识别鸟类血清中的非免疫球蛋白成分（如白蛋白、转铁蛋白等）

与鸟类免疫球蛋白轻链（κ/λ）及重链恒定区均有反应，保证对完整IgG分子的高灵敏度识别

可能与其他未列明物种的IgG发生交叉反应，建议在使用新物种样本前进行预实验

交叉反应性说明：由于本品识别的是保守的IgG重链和轻链表位，它与亲缘关系较近的物种（如爬行类或部分哺乳类）可能产生交叉反应。需要严格种属特异性时，建议设置平行阴性对照。

产品设计原理与生物学背景

抗重链和轻链（H+L）抗体的设计目标是识别完整的Ig分子，同时覆盖Fab段和Fc段。与传统仅针对Fc段的抗体相比，H+L抗体具有以下优势：

信号增强：每个IgG分子有两个轻链和两个重链，H+L抗体可结合更多表位，在免疫印迹和免疫组化中通常产生更强的信号。

适用范围广：无论目标IgG的亚类或Fc段是否被修饰（如还原处理），轻链表位通常保持可识别状态，适用于变性条件下的免疫印迹实验。

在禽类免疫学研究中，鸟类IgG（也称IgY）的结构与哺乳动物IgG存在差异（如缺少铰链区）。本品在设计时采用了多种鸟类IgG混合免疫，提高了对不同鸟类IgG结构变异的包容性。

应用与推荐稀释比例

以下推荐稀释比例为起始参考值。需注意，并非所有列出的应用均已在本实验室完成具体验证，建议用户在首次使用时根据样本类型和实验体系进行梯度优化。

应用 推荐稀释比例 备注

酶联免疫吸附测定 1:1000 - 1:30,000 用于包被酶标板时推荐1:100 - 1:500

免疫细胞化学 1:200 - 1:2,000

免疫组织化学 1:200 - 1:2,000

免疫印迹 1:1000 - 1:30,000 适用于还原和非还原条件

典型应用场景：

ELISA：检测禽类血清、卵黄或组织匀浆中的总IgG水平，适用于疫苗免疫效果评价、禽病血清学调查。

免疫印迹：鉴定重组表达的禽类抗体或抗原-抗体复合物，区分重链（约65-70 kDa）和轻链（约25-28 kDa）。

IHC/ICC：检测禽类组织切片或细胞样本中沉积或产生的IgG，用于研究局部免疫反应或感染灶的抗体分布。

使用与保存注意事项

保存条件：请于2-8°C条件下竖直保存，避免冷冻。反复冻融会导致抗体变性失效。在指定条件下，自收货之日起2年内稳定有效。

防腐剂提示：缓冲液含0.09%叠氮钠作为抗菌防腐剂。如后续实验涉及细胞培养、活细胞染色或对叠氮钠敏感的酶促反应（如HRP偶联前的处理），请通过透析、脱盐柱或超滤去除叠氮钠。

稀释缓冲液建议：推荐使用含1% BSA或正常山羊血清的PBS/TBS作为稀释液。对于禽类组织样本，建议添加0.1% Triton X-100以增强渗透性（适用于IHC/ICC）。

阴性对照设置：建议设置两种阴性对照——使用正常山羊IgG替代一抗，以及使用未经免疫的禽类血清样本，以区分特异性信号与背景吸附。

交叉物种使用注意：若应用于其他非鸟类物种（如爬行类），建议进行预实验并设置梯度稀释，评估背景信号水平。