山羊抗小鼠IgG重链和轻链交叉吸附抗体亲和纯化，复杂样本，背景更干净

产品概述

本品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊源抗小鼠免疫球蛋白G（IgG）重链和轻链多克隆抗体（货号：A90-516P），经抗原亲和纯化及多物种交叉吸附处理，可识别小鼠IgG的完整分子（包括重链和轻链）。未标记形式适用于ELISA、免疫细胞化学、免疫组织化学及免疫印迹等多种检测体系，是检测小鼠IgG总抗体或作为二抗系统核心组件的可靠工具。

基本规格参数

参数 具体信息

靶标 小鼠IgG重链和轻链

反应种属 小鼠

宿主 山羊

克隆性 多克隆

形式 全IgG

自身抗体亚型 IgG

标记物 未标记

纯度 抗原亲和纯化

抗原种属 小鼠

浓度 0.5 mg/ml

保存温度 2 - 8 °C

有效期 自收货之日起1年

缓冲液 含0.09%叠氮钠的磷酸盐缓冲盐水

生产与纯化工艺

该抗体的生产采用了多物种交叉吸附预处理工艺。具体而言，抗血清先经过牛、鸡、马、人、猪、兔和大鼠免疫吸附剂进行交叉吸附，以去除可能存在的交叉反应性抗体。随后，通过亲和层析技术，将小鼠IgG抗原偶联至琼脂糖凝胶珠，从处理后的抗血清中特异性分离目标抗体。

免疫球蛋白浓度的测定依据比尔定律：1 mg/ml IgG在280 nm波长下的吸光度（A280）为1.4。本品最终浓度为0.5 mg/ml，即用型设计降低了使用前稀释的工作量。

特异性与交叉反应性验证

经免疫电泳和酶联免疫吸附测定验证，该抗体对小鼠IgG具有特异性反应，同时识别其他小鼠免疫球蛋白亚类共有的轻链（κ和λ）。重要的是，该抗体与小鼠非免疫球蛋白血清蛋白无任何反应。

交叉吸附效果：经过7种物种（牛、鸡、马、人、猪、兔、大鼠）免疫吸附剂的处理，本品与上述物种IgG的交叉反应性均低于1%。这一特性显著降低了在含有多物种蛋白样本（如胎牛血清、人血清蛋白等）背景下的非特异性信号风险。

需注意：该抗体仍可能与其他未列明物种的IgG发生交叉反应，建议在涉及非模式物种的实验中进行平行阴性对照。

产品设计原理与生物学背景

抗重链和轻链抗体的设计目标是与完整的Ig分子（包括Fab和Fc区域）发生反应。免疫球蛋白G广泛存在于所有体液中，是机体抵御感染的主要手段。由于H+L抗体的识别表位涵盖重链和轻链的多个保守区域，其对小鼠IgG的检测灵敏度通常高于仅针对重链或Fc片段的抗体。同时，这也带来了潜在的跨物种交叉反应性——本品通过严格的交叉吸附将常见物种的交叉反应控制在极低水平，在灵敏度与特异性之间取得了良好平衡。

应用与推荐稀释比例

以下推荐稀释比例为起始参考值。需注意，并非所有列出的应用均已在本实验室完成具体验证，建议用户在首次使用时根据样本类型和实验体系进行梯度优化。

应用 推荐稀释比例 备注

酶联免疫吸附测定 1:1000 - 1:20,000 用于包被酶标板时推荐1:50 - 1:250

免疫细胞化学 1:200 - 1:2,000

免疫组织化学 1:200 - 1:2,000

免疫印迹 1:1000 - 1:20,000

典型应用场景：

ELISA：作为检测抗体检测小鼠IgG总水平，或用于夹心法捕获小鼠单克隆抗体。

免疫印迹：识别还原或非还原条件下的小鼠IgG重链（约55 kDa）和轻链（约25 kDa）。

IHC/ICC：检测组织切片或细胞样本中产生或结合的小鼠IgG。

使用与保存注意事项

保存条件：请于2-8°C条件下竖直保存，避免冷冻。反复冻融会导致抗体变性失效。在指定条件下，自收货之日起1年内稳定有效。

防腐剂提示：缓冲液含0.09%叠氮钠，作为抗菌防腐剂。如后续实验涉及细胞培养或对叠氮钠敏感的酶学检测（如HRP偶联前的处理），请通过透析、脱盐柱或超滤去除叠氮钠。

稀释缓冲液建议：推荐使用含1% BSA或正常血清的PBS/TBS作为稀释液，以降低非特异性吸附。

阳性和阴性对照：建议设置已知小鼠IgG阳性样本及同型对照（如正常山羊IgG）以评估背景信号。对于多物种样本，建议同时检测交叉吸附效果。

总结

本产品是一款经多物种交叉吸附、抗原亲和纯化的山羊抗小鼠IgG（H+L）多克隆抗体，浓度为0.5 mg/ml。其核心优势在于：识别小鼠完整IgG分子（重链+轻链），检测灵敏度高；与牛、鸡、马、人、猪、兔、大鼠IgG的交叉反应性<1%，背景控制优异；覆盖ELISA、ICC、IHC、WB四大应用场景，稀释窗口宽泛。适用于小鼠IgG总抗体检测、单克隆抗体筛选、免疫组化信号放大及蛋白免疫印迹体系，是实验室免疫检测工具箱中灵活、可靠的基础试剂。