成纤维细胞激活蛋白(FAP)是一种II型膜结合的丝氨酸蛋白酶,属于二肽基肽酶(DPP)亚家族。它参与伤口愈合和组织修复。在癌症(包括乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌和宫颈癌)中,激活的基质成纤维细胞上FAP的表达上调。它对肿瘤微环境(TME)有影响,在其中降低PEDF(色素上皮衍生因子)、血管生成素-1和VEGF-c(血管内皮生长因子c)的水平,并增加TGF-β(转化生长因子β),从而创造免疫抑制环境。它被用作促肿瘤基质的生物标志物,并与不良预后相关。动物模型研究表明,敲除FAP可以减少胰腺导管腺癌(PDA)的转移。因此,它被提议作为癌症治疗应用中小分子抑制剂的候选靶点。此外,其表达谱使其成为CAR-T应用的良好候选,目前正在进行临床前和临床试验。
FAP荧光检测试剂盒旨在用于测量FAP(成纤维细胞激活蛋白)蛋白酶活性,适用于筛选和分析应用。它采用方便的96孔板格式,包含纯化的重组FAP酶(氨基酸29-760)、DPP底物和DPP检测缓冲液,用于100次酶反应。
DPP荧光底物与含有FAP酶的样本孵育,产生可使用荧光读取器测量的荧光团。
荧光DPP底物1是一种荧光肽底物(Ala-Pro-AMC二肽)。在结合态时,荧光团AMC发出的能量被猝灭。蛋白水解作用释放AMC并发出荧光。荧光的增加与FAP活性成正比。
艾美捷BPS Bioscience-FAP检测试剂盒:
货号:80210
同义词:脯氨酸内肽酶FAP、170 kDa黑色素瘤膜结合明胶酶、二肽基肽酶FAP、成纤维细胞激活蛋白α、FAPalpha、明胶降解蛋白酶FAP、膜整合丝氨酸蛋白酶、脯氨酸后切割酶
试剂盒格式:荧光法
物种:人类
储存/稳定性:按照指导储存时,该检测试剂盒在收到后6个月内可达到最佳性能。
应用:用于研究酶动力学,以及在药物发现和高通量筛选(HTS)应用中筛选小分子抑制剂。
运输温度:-80°C
禁忌事项:DMSO >1%,强酸或强碱,离子型洗涤剂,高盐。
仅供研究使用
检测结果示例:
左图:在逐渐增加FAP浓度存在的情况下测量了FAP活性。
右图:在逐渐增加SP-13786(Selleckchem #S0842)浓度存在的情况下测量了FAP活性。结果以活性百分比表示,其中在没有抑制剂的情况下,FAP的活性被设定为100%。
文献参考:
Pure E. and Blomberg R., 2018, Oncogene 37: 4343-4357.
Bughda R., et al., 2021, Immunotargets Ther. 10:313-323.
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