重组人FAP蛋白，天然二聚体构象·C端His标签便捷检测

产品概述

由艾美捷代理BPS Biosciences推出的重组人FAP（成纤维细胞激活蛋白，又称Seprase）（His标签）（货号：80100），涵盖第29至760位氨基酸（全长成熟形式），C端携带6×His标签。该蛋白经Sf9昆虫细胞表达系统生产，并经亲和纯化获得高纯度产品，具有二肽酶活性，适用于肿瘤微环境及纤维化相关研究。

分子结构与设计

蛋白构建：包含人FAP全长成熟肽段（aa 29-760），C端融合6×His标签，便于金属螯合亲和纯化及下游免疫检测。

分子量：约86 kDa（单体），天然状态下FAP以170 kDa同源二聚体形式存在。

表达系统：Sf9昆虫细胞，适合跨膜蛋白胞外区的高水平可溶性表达。

背景与生物学意义

FAP（成纤维细胞激活蛋白）是一种II型跨膜丝氨酸蛋白酶，兼具二肽酶和胶原酶活性。其表达具有高度选择性——在正常成人组织中几乎不表达，但在超过90%的人类上皮源性肿瘤中，FAP在肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）表面显著上调。这一特征使其成为实体瘤微环境中极具吸引力的诊断标志物和治疗靶点。

功能与疾病关联：

肿瘤进展：FAP通过降解细胞外基质（如I型胶原）、促进上皮-间质转化（EMT）及参与免疫抑制性微环境的构建，在肿瘤生长、侵袭和转移中发挥多重作用。

纤维化疾病：FAP也参与伤口愈合和组织修复过程，在肝纤维化、肺纤维化等纤维增生性疾病中表达升高。

临床转化前景：目前，以FAP为靶点的策略涵盖多个方向——FAP特异性CAR-T细胞疗法、FAP激活式前体药物（FAP可切割连接子释放化疗药物）、以及FAP靶向放射性核素显像与治疗（如⁶⁸Ga-FAPI PET/CT），均已进入不同阶段的临床研究。

生化特性与质量控制

纯度：经SDS-PAGE鉴定，纯度≥90%，满足高要求体外实验标准。

比活性：≥83 pmol/min/?g，为酶动力学参数测定及抑制剂效能比较提供可靠基准。

缓冲体系：含40 mM Tris-HCl（pH 8.0）、110 mM NaCl、2.2 mM KCl、咪唑、3 mM DTT及20%甘油，该配方兼顾酶活性保护与下游应用兼容性。

储存稳定性：-80°C条件下可稳定保存至少6个月。建议分装后液氮速冻，避免反复冻融，使用时冰上解冻并轻轻混匀，切勿涡旋振荡。

核心应用价值

本品适用于以下研究场景：

1. FAP抑制剂筛选与评价：用于高通量筛选小分子化合物、抗体或多肽类FAP抑制剂，测定IC??值及抑制模式。

2. 酶动力学研究：测定FAP二肽酶活性的Km、Vmax等参数，研究底物特异性及酶活调控机制。

3. 选择性谱分析：评估化合物对FAP与其他丝氨酸蛋白酶（如DPP4、DPP9等）的选择性，助力开发高特异性药物。

4. 抗体与诊断工具开发：纯化抗原蛋白可用于FAP特异性单抗的制备、免疫检测方法建立，及FAPI类示踪剂的体外结合验证。

操作注意事项

解冻与取样：冰上解冻，使用前轻轻混匀并短暂离心。

分装保存：按单次用量分装后速冻，长期保存于-80°C。

应用范围：仅供研究用途（Research Use Only），不可用于临床诊断或治疗。

文献参考

1. Edosada,C.Y. et al., J. Biol. Chem. 281 (11), 7437-7444 (2006).

2. Edosada,C.Y. et al., FEBS Lett. 580 (6), 1581-1586 (2006).