重组人JAK2 (JH1结构域)蛋白，活性JAK2 JH1结构域，赋能结构生物学与共结晶研究

产品概述

由艾美捷代理BPS Biosciences推出的重组人JAK2（Janus激酶2）活性激酶结构域蛋白（His标签）（货号：40450），涵盖第808至1132位氨基酸（C端），即完整的JH1酪氨酸激酶结构域。该蛋白经Sf9昆虫细胞表达系统生产，并配备N端His标签（6×His）及凝血酶切割位点，兼顾纯化便利性与标签去除的灵活性。

分子结构与设计

蛋白构建：包含JAK2的JH1激酶结构域（aa 808-1132），该区域负责催化底物磷酸化，是激酶活性的核心执行单元。N端依次融合凝血酶切割位点与6×His标签。

分子量：约43 kDa。

表达系统：Sf9昆虫细胞，适合激酶结构域的高水平可溶性表达。

活性状态：本品为活性蛋白，经验证具有底物磷酸化能力。

背景与生物学意义

JAK2是非受体型酪氨酸激酶JAK家族的成员之一，在细胞因子受体信号转导中发挥关键作用。JAK2蛋白包含两个关键结构域：JH1（活性激酶结构域）和JH2（假激酶调控结构域）。JH2在正常情况下对JH1的激酶活性起负调控作用，而JH2结构域的突变则会导致JAK2过度活化。

临床关联：

2005年发现的JAK2 V617F突变（位于JH2结构域）是真性红细胞增多症（约95%患者）、原发性骨髓纤维化及原发性血小板增多症等骨髓增殖性肿瘤的主要驱动突变。

JAK抑制剂芦可替尼（Ruxolitinib）已获批用于骨髓纤维化、真性红细胞增多症及急慢性移植物抗宿主病（GvHD）的治疗。

然而，第一代JAK抑制剂对激酶选择性有限，可能脱靶作用于CHK2等其他激酶，因此开发高选择性的JAK2抑制剂仍是肿瘤与自身免疫疾病治疗领域的重要方向。

生化特性与质量控制

纯度：经亲和纯化，SDS-PAGE鉴定纯度≥70%。

比活性：≥124 pmol/min/μg，适用于酶动力学参数测定及抑制剂效能比较。

缓冲体系：含40 mM Tris-HCl（pH 8.0）、110 mM NaCl、2.2 mM KCl、3 mM DTT、0.04% Tween-20及20%甘油，该配方兼顾酶活性保护与实验体系兼容性。

储存稳定性：-80°C条件下可稳定保存至少6个月。建议分装后液氮速冻，避免反复冻融，使用时冰上解冻并轻轻混匀，切勿涡旋振荡。

核心应用价值

本品专注于JH1催化结构域，相较于全长蛋白或含JH2调控域的构建体，具有以下独特优势：

1. JH1特异性抑制剂筛选：直接靶向催化结构域，排除JH2调控域对化合物结合位点的干扰，适用于筛选ATP竞争性或变构抑制剂。

2. 酶动力学研究：测定JH1结构域固有的催化效率（Km、Vmax、kcat等参数），有助于理解突变对激酶活性的直接影响。

3. 选择性谱分析：在panel筛选中评估化合物对JAK2 JH1与其他激酶（如JAK1、JAK3、TYK2）的选择性差异。

4. 结构生物学研究：短截体（43 kDa）相较全长蛋白（约130 kDa）更易于结晶，适用于X射线共结晶或冷冻电镜分析。

操作注意事项

解冻与取样：冰上解冻，使用前轻轻混匀并短暂离心。

分装保存：按单次用量分装后速冻，长期保存于-80°C。

应用范围：仅供研究用途（Research Use Only），不可用于临床诊断或治疗。

文献参考：

1. Tono,C.,et al., Leukemia 19 (10), 1843-1844 (2005).

2. Goerttler,P.S., et al., Blood 106 (8), 2862-2864(2005).