产品概述
由艾美捷代理BPS Biosciences推出的重组人FcRn(新生儿Fc受体)复合物(FCGRT/B2M)His-Avi双标签·生物素标记,HiP高纯度(货号:71283),由FCGRT(Fcγ受体与转运蛋白α链)与B2M(β2-微球蛋白)两个亚基共表达组装而成。FCGRT亚基C端携带10×His标签及Avi-Tag,经体外酶促生物素化修饰(生物素化率≥90%)。该产品采用HEK293哺乳动物细胞表达系统,并经亲和纯化获得高纯度、低聚集体含量的优质蛋白。
分子结构与设计
蛋白构建:
FCGRT亚基:涵盖第24至297位氨基酸(胞外区),C端融合10×His标签及Avi-Tag。
B2M亚基:涵盖第21至119位氨基酸(成熟形式),无标签。
分子量:FCGRT约34 kDa;B2M约14 kDa(实际SDS-PAGE中因糖基化修饰迁移位置偏高)。
生物素化:利用Avi-Tag技术经BirA酶进行位点特异性生物素化(≥90%),确保生物素标记的均一性与定向性,避免随机标记对结合位点的遮蔽。
HiP?高纯度标准:纯度≥90%,且凝胶过滤检测显示聚集体含量<10%,确保产品以天然异源二聚体形式存在。
表达系统:HEK293哺乳动物细胞,保障蛋白正确折叠、组装及糖基化修饰。
背景与生物学意义
FcRn是一种由FCGRT与B2M组成的异源二聚体跨膜受体,在超过25种组织类型中表达,以脾脏和小肠中的表达水平最为显著。其核心生物学功能包括:
IgG稳态维持:FcRn通过结合内吞后进入酸性内体(pH ~6.0)的IgG分子,将其回收至细胞表面并在中性pH(~7.4)下释放,从而延长IgG在循环中的半衰期(约21天)。
母-胎IgG转运:在胎盘中,FcRn负责将母体IgG主动转运至胎儿循环,介导被动免疫保护。
白蛋白稳态调节:FcRn同时参与血清白蛋白的回收与半衰期延长。
临床转化价值:
延长治疗性抗体半衰期:通过抗体工程改造Fc区以增强FcRn结合亲和力,可延长抗体药物的体内半衰期,减少给药频率、改善患者依从性。
自身免疫疾病治疗:开发FcRn拮抗剂(如Efgartigimod)可阻断FcRn介导的IgG回收,加速致病性自身抗体的清除,已获批用于重症肌无力等自身免疫疾病。
生化特性与质量控制
纯度:SDS-PAGE鉴定≥90%,HiP标准确保高纯度与低聚集体(<10%)。
生物素化率:≥90%,确保标记效率满足结合实验需求。
缓冲体系:含8 mM磷酸盐(pH 7.4)、110 mM NaCl、2.2 mM KCl及20%甘油,接近生理条件,兼容多种结合实验体系。
储存稳定性:-80°C条件下可稳定保存至少6个月。建议分装后液氮速冻,避免反复冻融,使用时冰上解冻并轻轻混匀,切勿涡旋振荡。
核心应用价值
本品的Avi-Tag位点特异性生物素化设计及HiP高纯度标准,使其特别适用于以下研究场景:
1. FcRn-IgG结合分析:利用生物素标记的FcRn与链霉亲和素传感芯片(如SA芯片)偶联,通过表面等离子体共振(SPR)或生物膜干涉技术(BLI)精确测定抗体候选分子与FcRn的亲和力(KD)及动力学参数(ka/kd),指导Fc工程化改造。
2. 抗体药物半衰期筛选:通过FcRn结合实验评估不同Fc变体的pH依赖性结合特征(pH 6.0结合/pH 7.4释放),预测其体内半衰期表现。
3. FcRn拮抗剂筛选与表征:用于高通量筛选阻断FcRn-IgG相互作用的小分子、多肽或抗体候选物,支持自身免疫疾病药物研发。
4. ELISA/AlphaLISA方法建立:生物素标记的FcRn可作为检测系统中的捕获或检测元件,开发FcRn相关的免疫分析方法。
操作注意事项
解冻与取样:冰上解冻,使用前轻轻混匀并短暂离心。
分装保存:按单次用量分装后速冻,长期保存于-80°C。
应用范围:仅供研究用途(Research Use Only),不可用于临床诊断或治疗。

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