一、产品背景与原理
脂肪酸跨细胞膜的转运是由多种膜相关脂肪酸结合蛋白介导的主动调控过程,这些蛋白包括膜相关脂肪酸结合蛋白(FABPpm)、脂肪酸转位酶(CD36/FAT)以及脂肪酸转运蛋白1-6(FATP1-6)。其中,FATP家族成员具有组织特异性表达和底物偏好性,广泛参与产热、胰岛素应答、胆汁酸合成及皮肤稳态等生理过程。研究表明,脂肪酸转运失调(特别是棕榈酸摄取增加)与慢性肾病、非酒精性脂肪性肝炎、非酒精性脂肪肝病、肥胖及糖尿病等疾病的发生发展密切相关。
棕榈酸(C16:0)是人类饮食中最常见的饱和脂肪酸,占膳食脂肪摄入量的10-20%,约占血浆总脂质的25%和总饱和脂肪酸的65%。游离棕榈酸可被细胞摄取后用于甘油三酯或磷脂合成、线粒体β-氧化供能,或通过酰化修饰协助蛋白锚定于生物膜、促进蛋白-囊泡相互作用及调节G蛋白偶联受体功能。
由艾美捷代理Cayman推出的细胞脂肪酸(C16)摄取检测试剂盒(货号:702140)采用BODIPY荧光标记的棕榈酸作为探针,通过监测活细胞中荧光信号的动态变化,直接反映C16脂肪酸的摄取情况。与研究中常用的C12荧光脂肪酸相比,C16底物更贴近真实膳食成分,实验结论更具生理相关性。
二、试剂盒性能与储存
本试剂盒提供100次检测用量(96孔板规格),并附带lipofermata(FATP2强效抑制剂)作为抑制对照。试剂盒支持三种验证方案:
动力学摄取检测
终点法摄取定量
荧光成像分析
储存条件:请按照说明书“材料提供”部分的指引存放各组分,并在外包装标注的有效期内使用。不同组分可能有不同储存要求,请勿混放。
三、需要自行准备的实验材料
1. 黑色透明底96孔细胞培养板(用于荧光检测)
2. 待测细胞及相应无血清培养基(细胞应具备BODIPY-棕榈酸摄取能力)
3. 荧光检测设备:酶标仪或荧光显微镜,需配备激发/发射波长 488/508 nm 检测通道
4. 纯水:细胞培养级、玻璃双蒸水或去离子水均可
5. DMSO(细胞培养级)
四、实验设计要点
动力学检测:使用酶标仪连续记录细胞内荧光强度的实时变化,适用于研究药物干预、基因敲除或病理状态对脂肪酸摄取速率的影响。
终点法检测:在特定时间点终止摄取并测定总荧光强度,适用于高通量筛选或比较不同处理组的累积摄取量。
成像分析:通过荧光显微镜直接观察BODIPY-棕榈酸在细胞内的分布模式,可辅助定位摄取活性的亚细胞区域。
抑制对照:建议设置lipofermata处理组作为阴性对照,以验证检测体系中FATP2介导的摄取比例,确保数据解读的准确性。
五、应用场景建议
本试剂盒适用于:
脂肪酸转运蛋白功能研究
代谢疾病模型中脂肪酸摄取异常评估
候选化合物对脂肪酸摄取抑制活性的筛选
不同细胞类型或组织来源细胞摄取能力的比较
通过本试剂盒,研究者可在活细胞水平上直接、灵敏地监测C16脂肪酸的摄取动态,为脂质代谢调控机制研究及药物发现提供可靠的数据支撑。
六、文献参考
1. Schwenk, R.W., Holloway, G.P., Luiken, J.J.F.P., et al. Fatty acid transport acrossthe cell membrane: Regulation by fatty acid transporters. ProstaglandinsLeukot. Essent. Fatty Acids 82(4-6), 149-154 (2010).
2. Gimeno, R.E. Fatty acid transport proteins. Curr. Opin. Lipidol. 18(3), 271-276(2007).
3. Stahl, A. A current review of fatty acid transport proteins (SLC27). PflugersArch. 447(5), 722-727 (2003).

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