2-NBDG（荧光葡萄糖类似物）的使用与制备指南

一、产品基本信息

由艾美捷代理Cayman推出的2-NBDG（货号：11046）是一种荧光标记的葡萄糖衍生物，化学名称为2-脱氧-2-[(7-硝基-2,1,3-苯并噁二唑-4-基)氨基]-D-葡萄糖，简称NBD-葡萄糖。其分子式为C12H14N4O8，分子量342.3，纯度≥98%（α和β异构体混合物）。

光学性质：

紫外吸收峰：228、266、332、465 nm

荧光激发/发射最大值：475/550 nm

储存稳定性：-20°C保存，有效期≥4年。

二、溶解与储备液配制

2-NBDG为结晶固体，可按以下方式配制储备液：

溶剂 | 溶解度（约） | 备注

乙醇 | 20 mg/ml | 推荐有机溶剂

DMSO | 10 mg/ml | 细胞培养级

DMF | 10 mg/ml | 二甲基甲酰胺

操作要点：

溶解前建议用惰性气体（如氮气或氩气）吹扫溶剂以去除氧气。

储备液在使用前需用水性缓冲液或等渗生理盐水进一步稀释至工作浓度。

注意：确保最终稀释液中残留有机溶剂含量极低（<0.1%），否则低浓度有机溶剂也可能干扰细胞生理状态。

三、无有机溶剂直接溶解法

若实验需完全避免有机溶剂，可将结晶固体直接溶于PBS缓冲液（pH 7.2），溶解度约为10 mg/ml。

重要提示：水性溶液不建议储存超过1天，请现用现配，以免降解或微生物污染。

四、生物学应用与原理

2-NBDG是D-葡萄糖的荧光类似物，其摄取可被D-葡萄糖竞争性抑制，但不受L-葡萄糖或蔗糖影响，表明其通过葡萄糖转运蛋白（GLUT）进入细胞。

已证实的应用场景：

细菌葡萄糖摄取监测

活体哺乳动物细胞葡萄糖代谢成像

肿瘤活检组织葡萄糖摄取分析

该探针的激发/发射波长（475/550 nm）与常见FITC通道兼容，适合荧光显微镜、流式细胞术或酶标仪检测。

五、使用注意事项

1. 溶剂选择：根据下游实验体系选择合适的初始溶剂。若用于细胞实验，推荐先用DMSO溶解，再以无血清培养基或PBS稀释至终浓度（通常1-100 ?M），确保DMSO终浓度≤0.1%。

2. 避光操作：2-NBDG对光敏感，配制和使用过程中请注意避光。

3. 对照设置：建议设置D-葡萄糖竞争组作为阴性对照，以验证摄取信号的特异性。

4. 适用性验证：不同细胞系对2-NBDG的摄取效率存在差异，首次使用时建议进行浓度梯度和时间曲线预实验。

六、文献参考

1. Yoshioka, K., Takahashi, H., Homma, T., et al. A novel fluorescent derivative of glucose applicable to theassessment of glucose uptake activity of Escherichia coli. Biochim. Biophys. Acta 1289(1), 5-9 (1996).

2. Yamada, K., Saito, M., Matsuoka, H., et al. A real-time method of imaging glucose uptake in single, livingmammalian cells. Nat. Protoc. 2(3), 753-763 (2007).

3. Nitin, N., Carlson, A.L., Muldoon, T., et al. Molecular imaging of glucose uptake in oral neoplasia followingtopical application of fluorescently labeled deoxy-glucose. Int. J. Cancer 124(11), 1-20 (2009).

4. Thekkek, N., Maru, D.M., Polydorides, A.D., et al. Pre-clinical evaluation of fluorescent deoxyglucoseas a topical contrast agent for the detection of Barrett’s-associated neoplasia during confocal imaging.Technol. Cancer Res. Treat. 10(5), 431-441 (2011).