AAT Bioquest-R-藻红蛋白(PE)是从红藻中分离出来的。其主要吸收峰位于565nm,次要吸收峰位于496和545nm。AAT Bioquest提供这种预活化的PE,以促进PE与抗体和其他蛋白质(如链霉抗生物素蛋白和其他二次试剂)的结合。AAT Bioquest的预活化PE已准备好进行共轭,其产率远高于传统繁琐的基于SMCC的共轭化学。此外,AAT Bioquest的预活化PE通过蛋白质中丰富的氨基与蛋白质结合,而SMCC化学靶向必须通过抗体还原再生的巯基。
图:AAT Bioquest的预活化PE用Buccutite?FOL(提供)进行了预改性。您的抗体(或其他蛋白质)用AAT Bioquest的Buccutite?MTA(作为免费样品提供)修饰,得到MTA修饰的蛋白质(如抗体)。MTA修饰的蛋白质很容易与FOL修饰的PE(提供)反应,以比SMCC化学高得多的产率得到所需的PE抗体偶联物。此外,AAT Bioquest的预活化PE与MTA改性的生物聚合物的反应浓度远低于SMCC化学物质。
艾美捷AAT Bioquest-即用型预激活聚乙烯(PE):
单位大小:1 毫克
目录编号:2560
溶剂:水
校正因子(280 纳米):0.175
消光系数(厘米 -1 M -1):1960000
激发(纳米):565
发射(纳米):574
量子产率:0.82
H-短语:H303, H313, H333
危害符号:XN
预期用途:仅限研究使用(RUO)
R-短语:R20, R21, R22
储存:冷藏(2-8°C);尽量减少光照
UNSPSC 12171501
重要 PE已用AAT Bioquest的Buccutite? FOL预改性。您的抗体(或其他蛋白质)用AAT Bioquest的Buccutite? MTA改性,以得到MTA改性蛋白。MTA改性蛋白能与FOL改性的PE(提供)反应,得到所需的PE-抗体偶联物。
样品实验方案:
用Buccutite? MTA准备预激活抗体
将Buccutite? MTA在DMSO中重悬至约10毫克/毫升。
注意 未使用的MTA存放在-20°C;可以使用多达两次冻融循环。
在pH值为8.5-9.0的缓冲液中准备目标抗体(Ab),浓度高于1毫克/毫升。
将MTA加入到Ab溶液中,比例为每100微克Ab加入8-10微克MTA。
充分混合并在室温下反应60分钟,反应过程中旋转。
用脱盐柱纯化反应混合物以去除任何未反应的MTA。将缓冲液更换为PBS或您选择的其他缓冲液。
收集MTA激活的Ab。根据原始起始量的70%产率估算浓度。
与预激活PE偶联
将预激活PE在100微升ddH2O中重悬至10毫克/毫升。
注意 重悬后的预激活PE不稳定,不能存放超过一个月。
直接将预激活PE加入到MTA激活的目标Ab溶液中,比例为每100微克MTA激活的Ab加入300微克PE。
在室温下旋转混合物1-2小时。
现在Ab/PE偶联物已准备好使用。
注意 抗体偶联物应在载体蛋白(例如,0.1%牛血清白蛋白)和0.02-0.05%的叠氮钠存在下,存放在>0.5毫克/毫升。
注意 Ab/PE可在4°C下存放两个月。
可选:Ab/PE可通过尺寸排除色谱进一步纯化以获得更好的性能。
AAT Bioquest-即用型预激活聚乙烯(PE)文献参考:
Imaging Flow Cytometry for Phylogenetic and MorphologicallyBased Functional Group Clustering of a Natural Phytoplankton Community over 1?Year in an Urban Pond.
Authors: Dunker, Susanne
Journal: Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology (2020)
In Vivo Photodynamic Therapy With a Lipophilic Zinc(II) Phthalocyanine Inhibits Colorectal Cancer and Induces a Th1/CD8 Antitumor Immune Response.
Authors: Chiarante, Nicolás and Duhalde Vega, Maite and Valli, Federico and Zotta, Elsa and Daghero, Hellen and Basika, Tatiana and Bollati-Fogolin, Mariela and García Vior, María C and Marino, Julieta and Roguin, Leonor P
Journal: Lasers in surgery and medicine (2020)
Purification of Live Stem-Cell-Derived Islet Lineage Intermediates.
Authors: Rasouli, Niloofar and Melton, Douglas A and Alvarez-Dominguez, Juan R
Journal: Current protocols in stem cell biology (2020): e111
Application Settings versus Fixed Photomultiplier Tube Voltages for Optimal Cytometer Stability over Time, and Effect on Reusing a Compensation Matrix.
Authors: Andersen, Morten N?rgaard and Skovbo, Anni and Petersen, Charlotte Christie and Hokland, Marianne
Journal: Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology (2020)
Improved Flow Cytometric Light Scatter Detection of Submicron-Sized Particles by Reduction of Optical Background Signals.
Authors: Arkesteijn, Ger J A and Lozano-Andrés, Estefanía and Libregts, Sten F W M and Wauben, Marca H M
Journal: Cytometry. Part A : the journal of the International Society for Analytical Cytology (2020)
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