本品为艾美捷代理Jackson ImmunoResearch推出的Biotin-SP(长臂)AffiniPure 山羊抗小鼠 IgG(H+L)抗体,货号 115-065-062,RRID 为 AB_2338562。该抗体以山羊为宿主,靶向小鼠 IgG,特异性识别小鼠 IgG 重链与轻链(H+L),适用于多数免疫检测场景。
特异性与交叉反应
经免疫电泳和/或 ELISA 验证,该抗体可与小鼠 IgG 全分子反应,同时识别其他小鼠免疫球蛋白的轻链,但不对非免疫球蛋白血清蛋白产生结合。产品经 ELISA 和固相吸附测试,确保对人、牛和马血清蛋白的交叉反应降至最低,但仍可能与其他物种的免疫球蛋白发生交叉反应。
抗体形式与纯化
本品为完整 IgG 分子,通过免疫亲和层析从抗血清中分离,保留 Fc 段及两个由二硫键连接的 Fab 段,呈二价结构,平均分子量约 160 kDa。全 IgG 形式适用于绝大多数免疫检测流程,且成本效益较高。纯化过程使用偶联琼脂糖珠的抗原进行亲和层析。
缓冲液与保存
抗体冻干粉于 2–8°C 保存。复水时按产品规格书指定体积加入去离子水,若溶液不澄清可离心处理。工作稀释液须当日配制。未稀释液体在 2–8°C 下稳定约 6 周。复水后如需长期保存,应分装并于 -70°C 或更低温度冻存,避免反复冻融;亦可加入等体积甘油(ACS 级或更优)至终浓度 50%,于 -20°C 以液体形式保存。复水后有效期一年,若实测结果满足用途可适当延长。
缓冲液配方
0.01M 磷酸钠、0.25M NaCl,pH 7.6;稳定剂为 15 mg/ml 无 IgG、无蛋白酶牛血清白蛋白;防腐剂为 0.05% 叠氮钠。
建议工作浓度
ELISA 和 Western blot(使用酶标链霉亲和素)为 1:20,000–1:400,000;酶标免疫组化/细胞化学为 1:500–1:5,000;流式细胞术和荧光免疫组化/细胞化学为 1:200–1:1,000。最佳稀释度受抗原密度、通透性等因素影响,须经实验确定。
偶联物
Biotin-SP 为生物素与蛋白之间含 6 原子间隔臂的商标化偶联形式。在酶免疫分析中,相比无间隔臂的生物素化抗体,Biotin-SP 偶联抗体灵敏度更高,与碱性磷酸酶标记链霉亲和素配合时尤为明显;长臂使生物素远离抗体表面,更易与链霉亲和素结合位点接触。生物素化抗体需配合显色试剂使用,公司提供偶联荧光基团和酶的链霉亲和素及小鼠抗生物素抗体。

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