产品概述
本产品为艾美捷Bethyl Laboratories推出的山羊抗小鼠免疫球蛋白G(IgG)重链和轻链的多克隆抗体,货号A90-116P。抗体以未标记的完整IgG形式提供,可识别小鼠IgG的重链和轻链,同时与其他小鼠免疫球蛋白(IgA、IgM等)的轻链有交叉反应。该抗体适用于酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫细胞化学(ICC)、免疫组化(IHC)及蛋白质印迹(WB)等多种检测平台,作为通用型二抗或捕获抗体使用,广泛应用于小鼠免疫球蛋白的定性和定量分析。
核心参数
参数 详细信息
靶标 小鼠IgG重链和轻链
反应种属 小鼠
应用 ELISA, ICC, IHC, WB
宿主 山羊
克隆性 多克隆
形式 完整IgG
同型 IgG
偶联物 未偶联
纯度 抗原亲和纯化
浓度 1 mg/ml
保存条件 2 8 °C
有效期 收货后2年
缓冲液 磷酸盐缓冲液(PBS),含0.09%叠氮化钠
制备与纯化
本抗体采用抗原亲和层析法进行纯化。将小鼠IgG抗原偶联至琼脂糖凝胶珠上,装柱后使山羊抗血清通过亲和柱,特异性结合的抗体被洗脱收集。免疫球蛋白浓度通过比尔定律测定,设定1 mg/mL IgG在A280波长的吸光度为1.4。
经免疫电泳和ELISA验证,该抗体与小鼠IgG具有特异性反应,同时可与其它小鼠免疫球蛋白(IgA、IgM、IgD、IgE)共有的轻链结合。未检测到针对非免疫球蛋白血清蛋白的抗体。该抗体可能与其他物种(如大鼠、人、兔等)的IgG发生交叉反应,具体需由用户验证。
应用与推荐稀释度
下列推荐稀释度为起始参考值,用户需根据具体实验体系进行优化。部分应用尚未经我们实验室严格验证。
应用 推荐稀释度 备注
ELISA 1:1000 – 1:30,000(检测用)<br>1:100 – 1:500(包板用) 作为检测抗体时按高稀释度使用;作为包被抗体时按低稀释度使用
免疫细胞化学(ICC) 1:200 – 1:2,000 适用于细胞爬片或培养细胞的固定后染色
免疫组化(IHC) 1:200 – 1:2,000 适用于石蜡切片或冰冻切片,需优化封闭条件
蛋白质印迹(WB) 1:1,000 – 1:30,000 用于检测转移至膜上的小鼠IgG或含IgG融合蛋白
产品特性说明
特异性与交叉反应
本抗体为抗重链和轻链(H+L)类型,识别小鼠IgG的完整分子。其优势在于可同时结合IgG的重链(约50 kDa)和轻链(约25 kDa),因此无论在小鼠IgG的天然构象还是变性还原条件下均能有效识别。由于轻链在小鼠各免疫球蛋白亚类中高度保守,该抗体也会与小鼠IgA、IgM等其他免疫球蛋白发生反应,这一点在检测含有多种免疫球蛋白的样本时需注意。
可能存在的种属交叉反应:基于序列同源性,该抗体可能与其它哺乳动物(如大鼠、人、兔)的IgG或有交叉,建议在异种样本中使用时设置适当的阴性对照和特异性验证。
未偶联形式的灵活性
本抗体为未偶联形式(Unconjugated),用户可根据下游检测需要自行标记酶(HRP、AP)、生物素、荧光染料(FITC、Cy3、Alexa Fluor系列)或纳米颗粒。未偶联抗体避免了预标记可能导致的活性损失,提供了最大的实验设计灵活性。
储存稳定性
在2-8°C条件下可稳定保存2年(自收货之日起)。缓冲液为含0.09%叠氮化钠的PBS,叠氮化钠作为防腐剂可抑制微生物生长。注意:若计划将本抗体用于细胞培养或体内实验,需通过透析或脱盐柱去除叠氮化钠,因其对细胞具有毒性。
本抗体常用于以下场景:
ELISA:作为检测抗体,夹心法检测小鼠单克隆抗体杂交瘤上清中的抗体含量。
蛋白质印迹:检测表达的重组小鼠IgG融合蛋白或免疫沉淀后的小鼠IgG。
免疫组化/免疫细胞化学:检测小鼠来源的一抗在组织或细胞上的结合(需注意一抗宿主种属与二抗匹配)。
质量控制:定量分析生物制品(如治疗性单抗)中残留的小鼠IgG杂质。
总结:本山羊抗小鼠IgG(H+L)亲和纯化抗体具有宽反应谱、高纯度和长有效期(2年)的特点,适用于ELISA、ICC、IHC和WB等多种免疫检测技术。抗体浓度为1 mg/ml,推荐稀释度范围宽广(WB/ELISA最高可达1:30,000),兼顾经济性和信号强度。作为未偶联形式,用户可根据实验需求灵活标记不同检测标签。需注意该抗体识别轻链,因此会与小鼠其他免疫球蛋白发生交叉反应;同时可能与其他物种IgG有交叉,实验设计时需酌情验证和优化。本抗体是检测总小鼠IgG、筛选杂交瘤克隆、分析免疫沉淀复合物以及进行小鼠免疫应答研究的基础工具之一。

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