从表观遗传到药物筛选
·货号:BBK-3023-10K
·名称:【干冰】AptaFluor SAH Methyltransferase Assay
·品牌:BellBrook
·规格:10000Assays/384Wells
AptaFluor SAH Methyltransferase Assay Kit(货号3023,BellBrook Labs)基于SAH核糖开关分裂设计,通过SAH结合诱导RNA适配体组装,触发TR-FRET信号。
一、Bellbrook 独家AptaFluor SAH Methyltransferase Assay Kit,核心突破在于:
1. 超高灵敏度与选择性:
a. 直接检测SAH(S-腺苷同型半胱氨酸),浓度低至10 nM(Z因子>0.7),可区分仅差一个甲基基团的SAH/SAM(选择性>1000倍)。
b. 核糖开关与SAH的Kd达20 nM,远优于传统抗体法(灵敏度>100 nM)。
2. 广泛底物兼容性:
a. 耐受组蛋白、核小体、DNA/RNA等复杂底物(图3A-B),支持PRMTs、DNMTs、RNMTs等多种甲基转移酶。
3. 低干扰与高稳定性:
a. 直接同源检测避免酶偶联法的假阳性,化合物干扰率显著降低。
b. 信号稳定>24小时,适配高通量筛选(HTS)。
二、多领域应用案例:从基础科研到药物开发
1. 表观遗传学与癌症研究
·组蛋白甲基化调控:成功应用于PRMT5、DOT1L、METTL3/METTL14等酶活性检测,在生理浓度SAM(Km<1 μM)下揭示癌症相关甲基化机制。
·类器官药物响应模型:结合患者来源类器官(PDOs),筛选胆囊癌、胰腺癌的甲基化靶向疗法,预测临床治疗响应。
2. 抗病毒药物开发
·SARS-CoV-2抑制剂筛选:对nsp14 RNA加帽酶进行1,280种化合物高通量筛选,发现GSK2837808A等先导化合物,假阳性率<5%。
3. 神经退行性疾病与代谢研究
·表观遗传调控通路:适用于研究阿尔茨海默症中组蛋白H3K9甲基化、代谢疾病中DNA甲基化异常等机制
三、竞品对比:替代一线品牌的革命性选择
AptaFluor 3023在灵敏度和通用性上显著优于传统方法:
竞品名称 | 品牌 | 技术原理 | 主要局限 |
HTRF Methyltransferase | Cisbio | SAH抗体竞争法 | 抗体交叉反应、灵敏度>50 nM |
SAH ELISA Kit | New England Biolabs | 酶联免疫吸附 | 异相检测、步骤繁琐 |
酶偶联检测法 | Promega | SAH→Hcy荧光转化 | 易受化合物干扰、假阳性高 |
放射性标记法 | PerkinElmer | ?H-SAM掺入 | 放射性污染、法规限制 |
核心优势对比:唯一直接检测SAH:避免酶偶联或抗体法的信号偏差
四、结论:推动精准医学的多场景解决方案
AptaFluor SAH Assay Kit 3023通过核糖开关技术革新,为表观遗传机制解析、抗病毒药物筛选及癌症靶向治疗提供:
1. 通用平台:覆盖95%以上SAM依赖性甲基转移酶;
2. 高可信数据:Z因子>0.7满足FDA HTS标准;
3. 未来潜力:适配类器官模型、单细胞分析等前沿场景。
参考文献与数据验证:本文核心结论基于2024年5月发表于Journal of Biological Chemistry的同行评审研究[[1-9, 16-22, 59]],作者团队来自BellBrook Labs(利益声明见),技术原理经Ron Breaker实验室验证,符合ISO 13485质量标准。
附:实验流程图与结果示例
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