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BellBrook Labs:Transcreener cGAMP cGAS试剂盒

发布者:艾美捷科技    发布时间:2022-10-26     
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cGAS及cGAS-STING通路

cGAS-STING信号通路最初是作为天然免疫系统的一个重要组成部分被发现,其功能是检测胞浆DNA的存在,并在反应中触发炎症基因的表达。DNA通常存在于细胞核中,异常在胞浆中定位的DNA与肿瘤的发生或病毒感染有关,环状GMP-AMP合成酶(cyclic GMP-AMP Synthasec,cGAS)感知到本不应出现在细胞质的DNA时,会催化GTP和ATP之间发生化学反应并生成一种被称为环鸟腺苷酸(cvclic GMP-AMP cGAMP)的小分子,该小分子作为先天免疫系统的信使,会进一步激活免疫反应。因比,cGAS就像一个防盗报警器,cGAMP则是防盗报警器产生的电信号。cGAMP结合并激活STING,后者是一种作为细胞对异常胞浆DNA作出免疫应答的关键组分的跨膜接头蛋白,STING被激活后随TBK1从内质网一起转位至核周内体。TBK1激酶磷酸化并激活干扰素调节因子(IRFs)和NF-KB,后者诱导Ⅰ型干扰素和其他免疫应答基因。  


cGAS及cGAS-STING通路


2013年发现cGAS后不久,自我DNA的异常激活被证明是导致衰弱甚至致命的自身免疫性疾病的基础,如系统性红斑狼疮(SLE)和Aicardi–Goutieres综合征(AGS)。动物模型中的敲除研究清楚地表明,抑制cGAS是一种有希望的治疗干预方法,使得cGAS成为近些年热门的先天免疫靶点的酶。这里给大家带来全球领先先导药物高通量筛选专家BellBrook研发的cGAS抑制剂高通量筛选工具——Transcreener cGAMP cGAS检测试剂盒,可助力全球制药和生物技术公司、CRO和学术实验室加速药物发现。    


Transcreener cGAMP cGAS检测法通过测定生成的cGAMP来测定cGAS酶的活性。通过检测cGAMP输出,该方法提供了一种实时评估任何cGAMP产生酶活性的通用方法。Transcreener cGAMP检测技术使用了一种简单但高效的方法,包括cGAMP特异性抗体搭配远红荧光的示踪剂。反应中产生的cGAMP与示踪剂竞争,改变荧光特性并提供荧光读出。cGAS分析可用于荧光偏振(FP)时间分辨-荧光共振能量转移(TR-FRET)两种方式进行检测~


荧光偏振(FP)法原理示意图

荧光偏振(FP)法原理示意图

时间分辨-荧光共振能量转移(TR-FRET)法示意图

时间分辨-荧光共振能量转移(TR-FRET)法示意图


参考用途:

  • cGAS酶活性检测

  • 筛选cGAS抑制剂化合物库

  • 量化抑制剂效力

  • 确定cGAS-抑制剂滞留时间


相关实验验证数据请参见:Targeting the cGAS-STING Pathway Using a Homogenous, HTS Compatible Transcreener? cGAS Assay 


Transcreener cGAMP cGAS试剂盒优势:


操作简便,高通量,兼容96, 384和1536孔模式~

操作简便,高通量,兼容96, 384和1536孔模式~

出色的信号稳定性:24小时以上的信号依旧稳定性

出色的信号稳定性:24小时以上的信号依旧稳定性


产品性能展示:


cGAS由双链DNA激活,需要ATP和GTP底物来生产cGAMP

cGAS和 cGAMP 线性

cGAS由双链DNA激活,需要ATP和GTP底物来生产cGAMPcGAS和 cGAMP 线性

第一步轻松高通量筛选处化合物库

后续通过剂量反应确定抑制剂效力

第一步轻松高通量筛选处化合物库后续通过剂量反应确定抑制剂效力

cGAS被dsDNA激活

ATP和GTP依赖

cGAS被dsDNA激活ATP和GTP依赖


Transcreener cGAMP cGAS试剂盒组分:


组分描述
cGAMP Antibody二核苷酸cGAMP特异的抗体。
Tracer荧光的变化可以在FP或TR-FRET中读取
Stop & Detect Buffer B, 10X一种可以用来终止酶反应的缓冲液,用于终点法读数
ATPATP可用于酶反应和标准曲线
GTPGTP可用于酶反应和标准曲线
cGAMP标准品
Interferon Stimulatory DNAISD是一种45-bp的低聚物,用于激活cGAS酶


需要自备的试剂及仪器:


名称描述
cGAS酶cGAS(Cat# 2227)可以从艾美捷购买。
酶缓冲液我们通常使用含有20 mM TRIS (pH 7.5), 5 mM MgCl2, 0.01% Brij-35和1% DMSO(测试化合物的溶剂)的酶缓冲液,使用最适合你的酶条件的缓冲液。
检测用板子FP 格式:黑色板子,推荐康宁384孔板(Cat# 4514) TR-FRET格式:白色板子,推荐康宁384孔板(Cat #4513) 均可从艾美捷购买~
读板器需要能检测荧光偏振或者TR-FRET的读板器
移液器使用液体处理设备,可以精确分配亚微升体积到384孔板。
超纯水一些去离子水系统被核酸酶污染,核酸酶可以降解核苷酸底物和产物,降低了检测性能。小心处理和使用超纯水可以消除这个潜在的问题


相关产品推荐:


类别货号名称规格
荧光偏振法的试剂盒3024-1KTranscreener cGAMP cGAS FP Assay (1,000 Assay, 384 Well)1000 Assay
3024-10KTranscreener cGAMP cGAS FP Assay (10,000 Assay, 384 Well)10000 Assay
3024-100KTranscreener cGAMP cGAS FP Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well)10X10000 Assay
TR-FRET法的试剂盒3025-1KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (1,000 Assay, 384 Well)1000 Assay
3025-10KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10,000 Assay, 384 Well)10000 Assay
3025-100KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well)10X10000 Assay
cGAS2227Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human, Full-Length, 10 ?g10 ?g
2228Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human,?Full-Length,?100 ?g100 ?g
cGAS酶+试剂盒3024-1K-BIncludes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 ?g Human cGAS Enzyme1000 Assay+20 ?g
3024-10K-BIncludes Transcreener cGAS FP Assay 10K Kit and 200 ?g Human cGAS Enzyme10000 assay+200 ?g
3025-1K-BIncludes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K Kit and 20 ?g Human cGAS Enzyme1000 Assay+20 ?g
3025-10K-BIncludes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K Kit and 200 ?g Human cGAS Enzyme10000 assay+200 ?g
3024-1K-BIncludes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 ?g Human cGAS Enzyme1000 Assay+20 ?g
黑色板子2233Corning 96-Well Black Assay Plates (#3686), 3-Pack (200+ Assays)3-Pack
2229Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 3-Pack (1,000+ Assays)3-Pack
2230Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 30-Pack (10,000+ Assays)30-Pack
白色板子2234Corning 96-Well White Assay Plates (#3642), 3-Pack (200+ Assays)3-Pack
2231Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 3-Pack (1,000+ Assays)3-Pack
2232Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 30-Pack (10,000+ Assays)30-Pack


Note:以上产品仅用于科研,不能用于医疗及诊断~ 


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