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植物组织分离和升级版植物快速PCR方案

发布者:艾美捷科技    发布时间:2020-08-07     
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      【前情回顾】:

 

      【1】植物蛋白提取方案:PEB蛋白提取缓冲液,点击了解

      【2】纯化高质量植物DNA,您缺一个植物DNA提纯试剂盒!点击了解

      【3】植物microRNA纯化方案:植物microRNA提纯试剂盒,点击了解

      【4】植物染色质提取方案,点击了解

     【5】植物染色质免疫沉淀方案,点击了解

     【6】植物病原体检测方案,点击了解

      蛋白质纯化是旨在从细胞,组织或整个生物体中分离出一种或几种蛋白质。蛋白质纯化对于表征目的蛋白质的功能,结构和相互作用至关重要。蛋白质分离与提取是生命科学研究基础中的基础。植物细胞由于存在细胞壁的结构,因此比动物细胞蛋白的提取相对复杂。

 

植物dna提取

 

      提取植物中的DNA对植物基因工程,植物生理、病理研究等方面具有重要作用。不同植物的核酸结合蛋白的情况各不相同,因而需要采取不同的提取方法。植物中次生代谢产物多酚类化合物会影响DNA降解,同时多糖的污染也会影响植物DNA纯度。因此从富含多酚和多糖的植物组织中分离获得高质量的基因组DNA难度较大。一般常用方法如下:

 

      一,CTAB 法

 

      CTAB法即十六烷基三乙基澳化按法,CTAB是一种阳离子去污剂,它能与核酸形成复合物,这些复合物在低盐溶液中会因溶解度的降低而沉淀,而在高盐溶液中可解离,从而使DNA和多糖分开,再用乙醇沉淀DNA除去CTAB。在该法中使用的聚维酮 (PVP)与多酚结合形成复合物,从而可有效避免多酚类化合物影响DNA降解。

 

      二,SDS 法

 

      相比于CTAB,SDS法更加方便简单。近年来科研者们提出了利用SDSTris-Cl-EDTA直接裂解细胞使其释放出DNA的方法,后续的DNA纯化过程中通常采用酚/氯仿处理,但对于植物DNA纯化不是一个很好的选择,因为酚的使用可降低DNA的提取效率和纯度。实验证明,若采用较大的离心力和较长的离心时间,然后用氯仿一异戊醇代替酚来去除变性蛋白质,可以克服由于酚的掺入及残留对以后酶切带来的困难。

 

      三,氯化节法

 

      氯化节法的提取获得率较高。原因可能为氯化节不仅与植物细胞壁上的多糖经基反应生成醚,而且与细胞液中多糖物质反应破坏糖链,有利于DNA的释放和提纯。

 

      四,高盐低pH法

 

      高盐低pH法是指以无机盐和异丙烯为提纯试剂提取DNA的方法。通常采用的无机盐为低pH的醋酸钾,用来沉淀蛋白质。该方法方便省时,所需样品量少。

 

      五,果胶酶法

 

      利用果胶酶对植物破碎细胞进行抽提的一种技术。

 

果胶酶法

      如何提取植物组织中的可溶性蛋白质和代谢物?如何更快更简便的获得植物PCR扩增所需的模板?艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商,为您推荐植物组织提取试剂盒和升级版植物快速PCR试剂盒。

 

产品名称 产品货号 规格 说明
Plant Tissue Extraction Kit K296 50次 提取植物可溶性蛋白质和代谢物,用于各种下游应用,例如蛋白质印迹,2D凝胶电泳,免疫沉淀测定,酶活性测定和代谢物定量等。
PlantAdvance™ PCR Kit M1144 25次 在专利提取缓冲液中将一小片植物样品“涡旋-煮沸-涡旋”只需15分钟,即可获得可用于PCR的模板。gDNA提取过程消除了常规植物组织液氮冷冻,机械破坏,有机提取,柱DNA纯化或酒精沉淀等。

 

      植物组织提取试剂盒特色与优势

 

      1.从各种干燥和新鲜植物组织中提取可溶性蛋白以及其他生物分子和代谢物的有效方法;

      2.无需使用液氮,操作快速简单;

      3.易于使用,可确保恒定的蛋白质产量〜2-9 mg / ml(取决于样品类型)。

 

      厂家验证结果图

 

厂家验证结果图

 

     (A)植物组织裂解物的SDS-PAGE:各25μl生菜(20μg,泳道2),青椒(20μg,泳道3),鳄梨(40μg,泳道4)和兰花叶(10μg,泳道5)加载到4-20% SDS-PAGE上,并在电泳后用考马斯亮兰染色。按照试剂盒方案制备植物裂解物。泳道1:Marker。

     (B)使用PicoProbe™G6P荧光测定试剂盒(Cat#K687)测量兰花叶裂解液(5μg)中的葡萄糖-6-磷酸。

    (C)使用PicoProbe™G6PDH活性测定试剂盒(Cat#K751)测量兰花叶裂解物(0.6μg)中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的活性。

 

       升级版植物快速PCR试剂盒特色与优势:

 

      1.无需耗时的DNA纯化步骤;

      2.只需要少量样品;

      3.适用于各种植物样品的简单通用protocol;

      4.应用:植物PCR,基因/转基因检测,植物样品基因分型。

 

      升级版植物快速PCR试剂盒的使用流程图:

 

升级版植物快速PCR试剂盒的使用流程图

 

       厂家对灵敏度的验证结果图:

 

从各种叶片样品中扩增出700 bp的植物28S

 

从各种叶片样品中扩增出700 bp的植物28S。

 

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       作为一家具有高端的技术实力、先进的经营管理水平和完善的市场销售体系的生物高科技企业,总部位于武汉光谷高新技术开发区,服务面向全国。艾美捷科技是集进口试剂、实验室耗材销售、技术服务与合约开发为一体的专业化高科技公司,为用户提供专业的前沿资讯、完备的产品、整合的解决方案,及优质的物流服务。为了更好的服务客户,公司组建了一支经验丰富的研发团队-艾美捷生物技术中心,进入研发生产阶段,将更优质的产品推荐给国内生物领域的同仁们!

 

      艾美捷科技与国内外优秀的生物试剂供应商优保持着密切的合作关系,目前已成为众多国际知名品牌的中国总代理或一级代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在短时间内为用户提供专业的前沿资讯、完备的产品及物流服务。

 

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