AAT Bioquest-iFluor Ultra 594琥珀酰亚胺酯：精准的生物分子标记解决方案

荧光染料偶联抗体为识别蛋白质提供了一种工具，广泛应用于荧光细胞成像、流式细胞术、西方印迹、免疫组织化学等领域。使用荧光标记抗体的优势包括更高的灵敏度、多重能力以及易用性。iFluor? Ultra系列是AAT Bioquest受欢迎的iFluor?染料的最新升级，针对用于荧光成像和流式细胞术应用的抗体标记进行了优化。与Alexa Fluor? 594等其他类似染料相比，使用iFluor? Ultra 594制备的抗体偶联物在性能上远远优于前者。在相同条件下，iFluor? Ultra 594偶联物的亮度明显高于Alexa Fluor? 594偶联物。此外，iFluor? Ultra 594的荧光不受pH（4-10）的影响。iFluor? Ultra 594 SE染料稳定性合理，对蛋白质氨基基团显示出良好的反应性和选择性。iFluor? Ultra 594的光谱特性和反应性与Alexa Fluor? 594相似（Alexa Fluor 是ThermoFisher的商标）。

图：HeLa细胞与小鼠抗微管蛋白一起孵育，然后与AAT的iFluorTM Ultra 594山羊抗小鼠IgG偶联物或Alexa Fluor?594山羊抗鼠IgG一起孵育。

艾美捷AAT Bioquest-iFluor Ultra 594琥珀酰亚胺酯：

单位大小：1 毫克

分子量：1436.72

溶剂：DMSO

吸收峰（纳米）：585

校正因子（260 纳米）：0.07

校正因子（280 纳米）：0.05

消光系数（厘米 -1 M -1）：1800001

激发（纳米）：586

发射（纳米）：600

量子产率：0.52

H-短语：H303, H313, H333

危害符号：XN

预期用途：仅限研究使用（RUO）

R-短语：R20, R21, R22

储存：冷冻（< -15°C）；尽量减少光照

UNSPSC：12171501

库存溶液的准备：除非另有说明，所有未使用的库存溶液应在制备后分成单次使用的小份，并储存在-20°C。避免反复冻融。

储备溶液的制备：

1. 蛋白质库存溶液（溶液A）

将100微升的反应缓冲液（例如，1M 碳酸钠溶液或pH约9.0的1M磷酸缓冲液）与900微升的目标蛋白质溶液（例如抗体，蛋白质浓度尽可能>2 mg/mL）混合，得到1毫升蛋白质标记库存溶液。

注意     蛋白质溶液（溶液A）的pH值应为8.5 ± 0.5。如果蛋白质溶液的pH值低于8.0，使用1M 碳酸钠溶液或pH 9.0的1M磷酸缓冲液调整pH值至8.0-9.0的范围。

注意     蛋白质应溶解在1X磷酸盐缓冲盐水（PBS）中，pH 7.2-7.4。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中，必须对其进行透析，以1X PBS，pH 7.2-7.4，去除广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐（如硫酸铵和醋酸铵）。

注意     不纯的抗体或用牛血清白蛋白（BSA）或明胶稳定的抗体将不会被很好地标记。硫柳汞或汞硫柳汞的存在也可能干扰偶联反应。硫柳汞或汞硫柳汞可以通过透析或旋转柱去除，以获得最佳的标记结果。

注意     如果蛋白质浓度低于2 mg/mL，偶联效率将显著降低。为了获得最佳的标记效率，建议最终蛋白质浓度范围为2-10 mg/mL。

2. iFluor? Ultra 594 SE库存溶液（溶液B）

将无水DMSO加入iFluor? Ultra 594 SE的瓶中，制成10 mM库存溶液。通过移液或涡旋混合均匀。

注意     在开始偶联之前准备染料库存溶液（溶液B）。请立即使用。染料库存溶液的长期储存可能会降低染料活性。溶液B可以在避光和防潮的情况下冷冻保存两周。避免冻融循环。

AAT Bioquest-iFluor Ultra 594琥珀酰亚胺酯文献参考：

MicroRNA-126 inhibits pathological retinal neovascularization via suppressing vascular endothelial growth factor expression in a rat model of retinopathy of prematurity.

Authors: Fan, Yuan-Yao and Liu, Chi-Hsien and Wu, An-Lun and Chen, Hung-Chi and Hsueh, Yi-Jen and Chen, Kuan-Jen and Lai, Chi-Chun and Huang, Chung-Ying and Wu, Wei-Chi

Journal: European journal of pharmacology (2021): 174035

Retinal ganglion cells projecting to superior colliculus and pulvinar in marmoset.

Authors: Grünert, Ulrike and Lee, Sammy C S and Kwan, William C and Mundinano, Inaki-Carril and Bourne, James A and Martin, Paul R

Journal: Brain structure & function (2021)

A fully integrated isotachophoresis with a programmable microfluidic platform.

Authors: Shebindu, Adam and Somaweera, Himali and Estlack, Zachary and Kim, Jungtae and Kim, Jungkyu

Journal: Talanta (2021): 122039

Liquid Droplet Formation and Facile Cytosolic Translocation of IgG in the Presence of Attenuated Cationic Amphiphilic Lytic Peptides.

Authors: Iwata, Takahiro and Hirose, Hisaaki and Sakamoto, Kentarou and Hirai, Yusuke and Arafiles, Jan Vincent V and Akishiba, Misao and Imanishi, Miki and Futaki, Shiroh

Journal: Angewandte Chemie (International ed. in English) (2021)

Effect of VIRP1 Protein on Nuclear Import of Citrus Exocortis Viroid (CEVd).

Authors: Seo, Hyesu and Kim, Kyunghee and Park, Woong June

Journal: Biomolecules (2021)

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