在分子生物学的广阔世界里,脱氧核糖核酸(DNA)不仅是遗传信息的载体,更是无数基础研究与技术应用的核心材料。从酶活性分析到标准品制备,从亲和层析到教学演示,高质量、特性明确的DNA是不可或缺的基石。
Worthington以其在生物酶和生化试剂领域的深厚积淀,提供了一系列来源各异、形态多样的脱氧核糖核酸,变性,碎片化(货号:WBC-LS01440)产品,为生命科学研究构建了一个精准而可靠的工具库。
一、多样化的DNA来源与特性
Worthington的DNA产品线涵盖了从传统组织到现代分子生物学常用来源的多种DNA,每种都因其独特性质而适用于特定场景。
1.小牛胸腺DNA:经典与稳定
小牛胸腺是历史上最早也是最经典的DNA提取来源之一。Worthington采用自行开发的专利方法进行制备和纯化,其显著特点是相较于其他商业产品,具有更低的蛋白质和RNA污染水平。这种高聚合度的DNA是脱氧核糖核酸酶的绝佳底物。值得注意的是,该产品为钠盐形式,在使用时需要添加镁离子才能被DNase有效作用。
此外,Worthington还提供了将小牛胸腺DNA共价结合到纤维素上的衍生化产品:
*双链DNA纤维素:主要用于研究DNA结合蛋白,如转录因子、DNA修复酶等,在亲和层析中作为固定相。
*单链DNA纤维素:则专门用于结合单链DNA结合蛋白或用于某些特定的核酸杂交实验。这两种产品为蛋白质-DNA相互作用研究提供了强有力的工具。
2.鲑鱼睾丸DNA:高纯度的“天然”选择
鲑鱼睾丸DNA是另一个重要的DNA来源,采用基于Emanuel和Chaikoff方法的改良工艺制备。该产品保证至少75%为天然的双链核酸结构,纯度极高。由于其来源不同于哺乳动物,在某些实验中可以作为非哺乳动物背景的DNA代表,或用于需要高纯度天然DNA的生化分析。
同时,Worthington也提供了其变性及片段化版本。该产品通过机械剪切和热变性处理,使得DNA双链解开并断裂成较小片段。这种变性的鲑鱼睾丸DNA常用于核酸杂交实验中的封闭剂,以降低非特异性背景,也适用于研究单链核酸酶或某些需要单链底物的反应。
3.大肠杆菌DNA:原核生物的代表
分离自大肠杆菌的DNA,采用Marmur的经典方法制备。作为原核生物DNA的典型代表,它在研究细菌遗传学、原核基因表达调控、以及比较生物化学方面具有独特价值。对于研究能作用于原核DNA的酶类或探索原核与真核DNA性质差异,大肠杆菌DNA是不可或缺的试剂。
4.Lambda噬菌体DNA:分子生物学的“标尺”
Lambda噬菌体DNA是现代分子生物学实验室中至关重要的工具。Worthington的产品来源于氯化铯密度梯度离心纯化的噬菌体颗粒,纯度极高。其A260/A280比值≥1.8,表明蛋白质污染极少。在琼脂糖凝胶电泳中呈现均一条带,显示了其卓越的均一性。产品溶于pH8.0的10mMTris-HCl缓冲液,并含有1mMEDTA以抑制核酸酶活性。
更重要的是,Worthington进一步提供了通过限制性内切酶消化纯化LambdaDNA所得的DNA片段。这些预制的、长度确定的DNA片段是琼脂糖凝胶电泳中不可或缺的分子量标准。研究人员可以根据所使用的内切酶选择相应的产品,从而在凝胶上获得一系列精确的条带,用于估算未知DNA样本的分子大小。
二、技术说明与质量控制
为确保研究的准确性与可重复性,Worthington提供了明确的技术参数。其中,“一个A260吸光度单位相当于50?gDNA”的换算关系,是研究人员准确定量DNA浓度、进行后续实验配比的基础。
对于Lambda噬菌体DNA等精密试剂,存储条件至关重要。产品需在-20°C下冷冻保存,以长期维持其稳定性和完整性。一旦解冻,建议在2-8°C(冷藏)条件下保存,并应避免反复冻融,以防止DNA链的断裂和损伤。
三、相关产品构成的完整解决方案
Worthington的DNA产品并非孤立存在,它们与公司丰富的酶学产品线共同构成了一个相互关联、相互支持的生态系统。这些相关产品大多是直接或间接作用于DNA的工具酶:
*核酸酶:如脱氧核糖核酸酶I和II、微球菌核酸酶、S1核酸酶等,它们需要高质量的DNA作为底物来进行活性测定或应用研究。
*修饰酶与辅助试剂:如碱性磷酸酶、磷酸二酯酶I和II、蛋白酶K、无核酸酶的牛血清白蛋白以及各种核糖核酸酶,它们在DNA提取、纯化、修饰和分析的整个流程中扮演着关键角色。
*特殊酶类:如重组HIV逆转录酶,它能以RNA为模板合成DNA,扩展了核酸研究的维度。
这些产品与纯化DNA一起,为科研人员提供了从核酸制备、切割、修饰到检测的全流程工具,覆盖了分子克隆、基因组学、酶动力学研究等多个前沿领域。
结语
Worthington的纯化DNA产品系列,从经典的小牛胸腺到精确的LambdaDNA分子量标准,体现了其对生命科学研究者需求的深刻理解。通过提供来源清晰、纯度高、特性明确且配套完善的DNA产品,Worthington不仅为基础的生物化学研究提供了可靠材料,也为高级别的分子生物学实验提供了精准的参照和工具。在这个由DNA编码的生命奥秘探索之旅中,Worthington始终致力于成为科学家身边最值得信赖的伙伴与供应商。
文献参考:
Aktipis, S.
DNA - The Replicative Process and Repair , Textbook Biochem. with Clin. Correlations, 3rd ed , 767 , 1992
Albertini, J. and Garnier-Suillerot, A.
Iron-Bleomycin-Deoxyribonucleic Acid System. Evidence of Deoxyribonucleic Acid Interaction with the alpha-Amino Group of the beta-Aminoalanine Moiety , Biochemistry 23 , 47 , 1984
Alberts, B.
Prokaryotic DNA Replication Mechanisms , Phil Trans R Soc Lond 317 , 395 , 1987
Alberts, B. and Herrick, G.
, Methods in Enzymology Vol. 21 , S. Colowick and N. Kaplan , Academic Press, NY , 198 , 1971
Antonarakis, S.
Recombinant DNA Technology in the Diagnosis of Human Genetic Disorders , Clin Chem 35 , B4 , 1989
微信扫码在线客服