Worthington丨艾美捷代理脱氧核糖核酸酶 I，重组，无动物成分，生物工艺级方案

在分子生物学实验室和生物制药的生产线上，DNA与RNA的纯化是无数实验和工艺流程的基石。然而，一个常见的困扰是：在精心制备的RNA样品中，总会被其“分子近亲”——基因组DNA所污染；在细胞培养或蛋白表达过程中，细胞破裂释放出的DNA会导致溶液粘稠度急剧升高，难以处理。此时，我们需要一位精准的“清道夫”来清除这些不受欢迎的DNA。脱氧核糖核酸酶I正是扮演这一角色的关键酶。而通过现代重组技术生产的脱氧核糖核酸酶 I，重组，无动物成分，生物工艺级（货号：WBC-LS006322），更以其卓越的纯度和无与伦比的安全性，成为了这一领域的“守护者”。

一、技术革新：为何选择重组DNaseI？

传统的DNaseI大多从牛胰腺中提取。然而，牛胰腺本身是核糖核酸酶A的富集来源，这使得商业化的传统DNaseI制剂中往往难以避免地含有高水平的RNase污染。当研究人员用它来降解RNA样品中的DNA时，残留的RNase会反过来降解宝贵的RNA，导致实验失败，尤其是在对RNA完整性要求极高的应用如RT-PCR中，这无疑是灾难性的。

重组技术的引入彻底改变了这一局面。沃辛顿的重组牛胰腺DNaseI是在毕赤酵母中表达生产的。这种酵母宿主本身的内源性RNase水平极低，这使得从发酵伊始就能从根本上杜绝RNase的污染。通过先进的纯化工艺，最终获得的重组DNaseI产品中，RNase活性低至无法检测的水平，为对RNA酶敏感的精密应用提供了前所未有的保障。

更重要的是，整个生产和纯化过程完全不含任何动物源性成分。这不仅避免了传统方法可能引入的牛源性病原体风险，也使得该酶完全符合生物制药行业对于原料的严格监管要求，在细胞治疗、疫苗生产等对安全性有极致追求的生物工艺中成为不可或缺的放心之选。

二、核心应用：精准清除DNA的四大场景

重组DNaseI的“清道夫”角色在以下关键应用中表现得淋漓尽致：

1.RNA制备中的基因组DNA清除：在进行RT-PCR之前，使用重组DNaseI处理RNA样品，可以高效降解残留的基因组DNA，有效防止在后续的PCR扩增中出现假阳性信号，确保基因表达定量结果的准确性与可靠性。同样，在Northern印迹分析前处理样品，也能避免DNA与RNA探针的非特异性结合，使结果更加清晰可信。

2.体外转录反应的后处理：在利用DNA模板进行体外转录合成RNA后，需要将模板DNA去除，以获得纯净的转录产物。重组DNaseI能够高效完成这一任务，且由于其极低的RNase污染，能确保新合成的RNA产物完好无损。

3.生物制药过程中的关键工具：在哺乳动物细胞培养生产抗体、病毒疫苗等生物制品时，细胞凋亡和裂解释放的DNA会使培养液变得极其粘稠，严重阻碍下游的过滤、纯化等工序。重组DNaseI的加入可以迅速降解这些DNA，显著降低溶液粘度，提高生产效率与产品得率。其无动物源的特性也确保了最终生物药品的更高安全性。

4.蛋白提取液中的DNA清理：在细胞裂解物中进行蛋白研究时，大量的DNA会干扰蛋白的电泳分离和纯化。加入DNaseI处理，可以使样品变得均质，更利于后续分析。

三、使用指南：单位定义、缓冲体系与储存

要高效使用重组DNaseI，必须了解其工作特性：

*单位定义：需要注意的是，不同厂商对“Kunitz单位”的定义可能存在差异。沃辛顿的定义是：在37°C、pH7.8的特定缓冲液（50mMTris,1mMMg??,1mMCa??）中，一个Kunitz单位能够在10分钟内消化1mg的小牛胸腺DNA（或pUC19/λ噬菌体DNA）。其他供应商的报告值可能比此高2-4倍，因此在替换酶产品或优化实验条件时，需特别留意。

*二价阳离子需求：DNaseI的活性严格依赖于Mg??和Ca??。沃辛顿提供的10XDNaseI反应缓冲液已含有最适浓度的这些离子，为反应创造了理想环境。

*储存与稳定性：该酶通常提供于含有50%甘油的储存缓冲液中（5mM醋酸钙，4mg/ml甘氨酸，pH5.0），建议于-20°C保存。在此条件下，酶活性可长期保持稳定。50%的甘油能防止溶液在-20°C时冻结，便于随时取用。

四、协同作用的酶家族

在核酸处理的相关应用中，重组DNaseI并非孤立存在。沃辛顿提供了一系列与之相关的酶产品，共同构成一个完整的解决方案：

*RNaseA：当需要特异性降解RNA而保留DNA时使用。

*核酸酶：如微球菌核酸酶，具有更广泛的核酸降解能力。

*蛋白酶K：在核酸提取中用于降解蛋白质。

*无核酸酶BSA：可作为酶的稳定剂加入反应体系，而不引入核酸酶污染。