Worthington丨艾美捷代理胶原酶，D型，不含动物成分应用全解析

在生命科学的微观世界里，要将一个复杂的组织解离成一个个充满活力的独立细胞，犹如拆解一座精密的建筑而不损及其中的居民，是一项极具挑战的任务。这座建筑的“钢筋混凝土”主要成分，便是细胞外基质中的胶原蛋白。而专司解构此胶原的“分子拆解专家”，正是胶原酶。其中，源自细菌的Worthington胶原酶家族，以其高效、广谱的特性，成为了细胞分离领域中无可替代的核心工具。

一、革命性的创新：无动物源胶原酶

随着生物制药和细胞治疗领域的飞速发展，对生物工艺过程中避免引入任何潜在动物源性病原体（如病毒、朊病毒）的要求日益严苛。为满足这一需求，Worthington推出了全新的无动物源胶原酶系列--胶原酶，D型，不含动物成分（货号：WBC-LS004162）。这些酶在完全不含动物成分的培养基中培养产生，专为需要极高安全标准的生物处理应用而设计。

该系列包含多种型号，以适应不同的消化需求：

AFA型：作为该系列的基准，其胶原酶和次级蛋白酶的水平与经典的1型和2型胶原酶相似，提供了均衡的消化能力。

AFB型：含有比AFA型更高的胶原酶和酪蛋白酶活性，适用于需要更强力解离的组织。

AFC型：其胰蛋白酶样活性极低，类似于4型胶原酶，可最大限度地减少对细胞膜蛋白和受体的损伤，特别适用于对酶敏感的细胞分离。

AFD型：其比活性（单位重量蛋白的酶活性）比AFA型高出两到三倍，效率极高。

此外，该系列所有型号均提供0.22微米过滤、50毫克/瓶的预包装形式，可直接复溶使用，在保证无菌安全的同时，提供了极大的便利性。

二、作用机理：独特的“三重螺旋”切割者

胶原酶属于内肽酶，其独特之处在于能够直接消化天然胶原蛋白的三股螺旋区域。胶原是动物结缔组织中最主要的纤维成分，结构极其稳固。与只能特异性切割天然胶原的脊椎动物胶原酶不同，细菌胶原酶（如Worthington产品）具有更广泛的底物特异性。

它能降解不溶于水的天然胶原，也能作用于可溶性的变性胶原；几乎能攻击所有类型的胶原，并且能在三股螺旋区域内进行多次切割。这种“粉碎式”的消化能力，使其成为瓦解组织结构的超级能手，为细胞释放铺平道路。

三、经典胶原酶谱系：针对性的解决方案

除了创新的无动物源系列，Worthington提供了一系列经过时间检验的经典胶原酶类型，研究人员可根据目标组织的特点进行精准选择：

纯化胶原酶：含有极高的胶原酶活性，同时将次级蛋白水解活性降至最低，适用于胶原的结构与生物合成研究。

1型：作为部分纯化的胶原酶，它保持了胶原酶、酪蛋白酶、氯霉素酶和胰蛋白酶样活性之间的原始平衡，是广泛应用的通用型选择。

2型：含有相对更高的蛋白酶活性，尤其是氯霉素酶，适用于富含结缔组织的坚韧样本。

3型：含有最低水平的次级蛋白酶，作用最为温和。

4型：专门设计为极低的胰蛋白酶样活性，以限制对膜蛋白和受体的损害，是分离胰岛细胞、神经元等敏感细胞的理想选择。

5型：含有更高的胶原酶和酪蛋白酶活性，解离能力更强。

6型：含有高胶原酶活性，且酪蛋白酶与胶原酶的比例约为2:1，设计上富含II型胶原酶，相对于I型比例更高。

7型：其胶原酶和酪蛋白酶活性比1型和2型高出四倍，效力极强。

四、广泛的应用场景

凭借其温和而高效的消化特性，Worthington胶原酶被广泛应用于各类细胞的分离：

脂肪细胞、肝细胞、肺、上皮和肾上腺组织细胞的分离。

心肌细胞以及骨、软骨、肌肉、甲状腺和内皮组织细胞的分离。

乳腺及其他各种软组织的分离。

人类和猪胰腺胰岛细胞的分离。

使用含有混合蛋白水解活性的粗制胶原酶处理组织，可以实现对细胞间基质的温和、选择性消化，同时对细胞本身的损伤极小，能最大程度地保持细胞活率。

五、酶学特性与调控

胶原酶的活性受到多种因素的精确调控：

激活剂：Ca??和Zn??是其重要的激活剂，对于维持酶的构象和催化功能至关重要。

抑制剂：螯合剂如EDTA和EGTA能通过剥夺必需的金属离子而强烈抑制其活性。其他抑制剂包括半胱氨酸、组氨酸、DTT、2-巯基乙醇、邻二氮菲以及Hg??、Pb??等重金属离子。值得注意的是，它不受DFP或血清的抑制。此外，大型血浆糖蛋白α2-巨球蛋白是天然的胶原酶抑制剂。

结语

综上所述，Worthington胶原酶家族，从经典系列到创新的无动物源系列，为生命科学和医学研究提供了一个全面而精细的工具箱。无论是进行基础的细胞生物学研究，还是推进前沿的细胞治疗与再生医学，理解并选择合适的胶原酶类型，都是成功获取高活力、高纯度细胞的关键第一步。这把精准的“分子手术刀”，将继续在科学家探索生命奥秘的征程中，扮演着不可或缺的角色。