产品概述
由艾美捷代理Cell Biolabs推出的QuickTiter MuLV核心抗原ELISA检测试剂盒(货号:VPK-156,96次测定)是一款用于鼠白血病病毒(MuLV)核心抗原蛋白(Gag p30)定量检测的酶免疫分析工具。该试剂盒检测灵敏度达300 pg/mL,可提供包含标准曲线及样品检测在内的96次实验用量。
鼠白血病病毒属于逆转录病毒家族,能够感染鼠类宿主及其他脊椎动物并诱发肿瘤。基于Moloney MuLV的逆转录病毒载体广泛用于各类靶细胞的基因转移研究。近年来发现的人类异嗜性鼠白血病相关病毒(XMRV)与MuLV高度同源(Gag p30核心抗原同源性达96%)。本试剂盒为MuLV相关研究及病毒载体质量控制提供了可靠的检测手段。
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法进行检测:
1. 抗MuLV p30单克隆捕获抗体预先包被于微孔板
2. 样品或标准品中的MuLV核心抗原(p30)与捕获抗体结合
3. 加入抗MuLV p30多克隆抗体,与已捕获的抗原结合
4. 经孵育和洗涤后,加入HRP标记的二抗,与多克隆抗体结合
5. 洗去未结合的酶标抗体,加入HRP显色底物
6. 产生有色产物,其颜色深度与样品中MuLV核心抗原含量成正比
7. 加入终止液终止反应,于450 nm处读取吸光度值
8. 参照重组MuLV p30标准品制备的标准曲线,计算样品浓度
试剂盒组分
Box 1(室温运输)
抗MuLV p30抗体包被板(Part No. 315601):96孔板
抗MuLV p30多克隆抗体(Part No. 315602):20 uL
HRP标记二抗(Part No. 231009):20 uL
检测稀释液(Part No. 310804):50 mL
Triton X-100溶液(Part No. 310805):15 mL,5% Triton X-100/TBS
10×洗涤缓冲液(Part No. 310806):100 mL
底物溶液(Part No. 310807):12 mL
终止液(Part No. 310808):12 mL
Box 2(冰袋运输)
重组MuLV p30标准品(Part No. 315603):100 uL,10 ug/mL,溶于含500 mM咪唑、0.1% BSA、0.01% NaN?的PBS缓冲液
需自备材料
MuLV待测样品(纯化病毒或未纯化病毒上清)
0.45 um滤器
酶标仪(可读取450 nm,可选620 nm作为参考波长)
储存条件
收货后,请将重组MuLV p30标准品分装并于-20°C保存,避免反复冻融。其余组分于4°C保存。
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*本试剂盒仅限研究使用,不可用于诊断目的。
文献参考
1. Stoye, JP, Coffin, JM (1987) J Virol. 61: 2659–69.
2. D'Souza V, Dey A, Habib D, Summers MF (2004) J Mol. Biol. 337: 427–42.
3. D'Souza V, Summers MF (2004) Nature 431: 586–90.
4. Urisman A, Molinaro RJ, Fischer N, et al. (2006) PLoS Pathogens 2: e25.

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