生物素标记K63 TUBE：适配亲和纯化、Far-Western、原位标记等多元实验场景

K63型多聚泛素链是泛素修饰体系中功能独特的一类翻译后修饰，不同于介导蛋白酶体降解的K48泛素链，K63连接泛素链主要参与天然免疫信号转导、DNA损伤修复、蛋白复合物组装等关键生物学过程。但K63泛素修饰在细胞内丰度较低，又极易被JAMM家族去泛素化酶剪切降解，对其特异性识别、富集与检测一直是泛素研究领域的技术难点。由艾美捷代理LifeSensors推出的生物素标记K63 TUBE（货号UM304），基于串联泛素结合元件TUBEs开发，为K63泛素链的研究提供高特异性的工具。

TUBEs即串联泛素结合结构域，对比单个UBA结构域，对多聚泛素的亲和力最高提升1000倍，还可以对多聚泛素链起到保护作用，能够稳定捕获低丰度的泛素修饰蛋白。UM304为生物素标记的K63?TUBE，分子带有1?2个生物素标签，对K63连接泛素链的偏好性相比其他泛素连接类型高出1000?10000倍。该分子由多个泛素互作基序通过刚性连接子组装而成，保证了对K63链的高度选择性，体外验证实验证实，它可特异性识别K63多聚泛素链，几乎不结合K48、K11等其他类型泛素链。

该产品由大肠杆菌表达制备，分子量22?kDa，SDS?PAGE检测纯度大于90%，总规格50?μg，溶解于pH7.2的PBS缓冲液，溶解度大于30?mg/mL。储存条件为?80℃，可稳定保存超过一年，实验过程中应当避免反复冻融，防止蛋白活性下降。依托生物素?链霉亲和素的强相互作用，该工具拥有灵活多元的实验场景：既可以用于Far?Western配体印迹，直接在膜上检测样本中的K63泛素化蛋白；也可结合亲和素固相载体，从细胞、组织裂解液乃至生物体液中亲和纯化K63泛素修饰底物；还能够用于组织化学原位标记，定位样本内K63多聚泛素信号；同时还可在裂解体系中干预K63依赖的生化过程，辅助鉴定目标蛋白的泛素连接类型。

传统依靠泛素抗体很难区分不同连接形式的泛素链，而UM304凭借极强的K63偏好性，能够有效区分K63与其他亚型泛素链，摆脱对特异性泛素连接抗体的依赖。HEK293细胞裂解液的验证结果表明，随着上样蛋白量提升，可以清晰检出内源K63多聚泛素修饰条带，适用于低丰度样本的检测。

在天然免疫、DNA损伤应答等方向的研究中，准确解析K63泛素修饰是解析信号通路的关键。UM304兼具高特异性、使用灵活的优势，适配印迹检测、亲和纯化、原位标记多种实验方案，助力科研人员鉴定目标蛋白的泛素修饰类型，捕获生理状态下的K63泛素化蛋白。本产品仅限科研使用，不可用于人或动物的诊断与治疗。