Spirochrome SiR-肌动蛋白试剂盒：活细胞 F-肌动蛋白标记利器

SiR-actin 是基于硅罗丹明（SiR）荧光团和肌动蛋白结合天然产物海兔素（jasplakinolide）的化合物。SiR-actin 能够在活细胞中特异性地标记 F-肌动蛋白，并且背景信号极低。SiR-actin 的关键特性包括：i）远红光吸收和发射波长；ii）细胞通透性；iii）荧光特性；iv）与超分辨率显微镜（STED 和 SIM）兼容。这些特性在一个单一探针中的独特组合，使 SiR-actin 处于卓越的前沿。

作为Spirochrome在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐Spirochrome热销产品SiR-肌动蛋白试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

SiR-肌动蛋白试剂盒

物理性质

吸收波长：652 nm

发射波长：674 nm

最大摩尔吸光系数：1.0×10⁵ mol^-1·cm^-1

分子量：1241.6 g/mol

分子式：C71H88N8O10Si

试剂盒内容：50 nmol SiR-actin 和 1 umol 维拉帕米

储存与操作

收到试剂后，应将化合物保存在 -20°C 以下。使用无水 DMSO 配制化合物溶液。使用后，将溶液保存在 -20°C 以下。在打开小瓶之前，应让其升温至室温。如果储存得当，化合物应可稳定数月。注意：DMSO 溶液应特别小心处理，因为 DMSO 会促进有机分子进入组织。请按照所有相关当地法规处理这些试剂。

标记协议

注意：本协议是使用粘附在盖玻片上的人类成纤维细胞优化的，并已在其他常见细胞系中得到验证。实验协议的建议应作为起点，每种细胞类型的最优标记条件应通过实验确定。SiR-actin 基于稳定肌动蛋白的药物海兔素，因此可以在活细胞中改变肌动蛋白的动态。尽管在高达 3 uM 的 SiR-actin 浓度下，有丝分裂时间保持不变，但在培养的 HeLa 细胞中，超过 100 nM 的浓度会导致细胞增殖指数降低。如果计划进行长期成像实验且肌动蛋白动态至关重要，我们建议将 SiR-actin 的浓度保持在 100 nM 或以下。对于其他用途，建议使用 1 uM 的 SiR-actin 进行染色。

制备 1 mM 储备液：将 SiR-actin 小瓶的内容物溶解在 50 uL 无水 DMSO 中，制成 1 mM 储备液。该溶液应保存在 -20°C 或以下。不要将溶液分成小份，因为它们会更快降解，且该化合物不会因多次冻融循环而改变。如果储存得当，该储备液应可稳定三个月或更长时间。如果需要准确测定储备液的浓度，将 1 uL 1 mM 储备液稀释在 99 uL 含 0.2% SDS 的 PBS 中。在室温下静置 15 分钟后，测量 652 nm 处的吸光度。使用上述摩尔吸光系数计算浓度。

制备染色液：将 SiR-actin 稀释到所需浓度的细胞培养基（例如 DMEM + 10% 胎牛血清）中，并短暂涡旋。由于染色效率可能取决于细胞系，建议首次尝试使用 1 uM 的浓度进行染色，以快速获得强染色效果，然后在后续实验中降低 SiR-actin 的浓度，直到获得最佳染色效果（见下表标记浓度和孵育时间）。某些细胞系可能表达高水平的外排泵，对 SiR-actin 染色效果不佳。在染色液中加入 10 uM 的维拉帕米（一种广谱外排泵抑制剂）通常可以显著改善染色效果。有关维拉帕米与 SiR 探针配合使用的

Spirochrome 成立于 2015年，总部位于瑞士，是一家专注于活细胞荧光成像技术的生物科技公司。公司核心技术源于国际权威学术期刊《Nature Chemistry》与《Nature Methods》发表的两项创新研究成果—— SIR与SPY荧光母核。该类染料具有卓越的稳定性、超高荧光信号与极低背景噪声，能够突破传统成像限制，适用于多种超分辨荧光成像技术， 助力科学家开启活细胞微观世界的分子尺度探索时代。

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