EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集（MeRIP）试剂盒，低偏倚高分辨定位m6A

产品概述

由艾美捷代理Epigentek推出的EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集（MeRIP）试剂盒（货号：P-9018）是一套完整的优化缓冲液与试剂组合，专为从低起始量RNA中富集含m6A的RNA片段而设计。富集产物可通过PCR鉴定特定区域的m6A，或利用Illumina平台及其他方法进行下一代测序，实现全转录组范围的m6A图谱分析。该试剂盒凭借创新的工作原理、优化的实验流程和精心配制的组分，能够以极低的非特异性背景捕获m6A片段。

核心功能优势

高富集效率：试剂盒采用RNA切割酶混合物，在片段化RNA的同时，切割/去除目标m6A序列两端的任何RNA序列，而不影响被抗体占据的RNA区域。只有结合了抗m6A抗体的短RNA片段被保留，从而可靠鉴定真正的m6A富集区域，实现高分辨率定位。

低起始量：未结合RNA的切割与免疫捕获在同一单管中完成，最大限度保护目标m6A区域并减少样本损失，起始RNA可低至500 ng。

极低背景：切割目标m6A序列两端的未结合RNA序列，可最大限度降低MeRIP/测序背景，使数据分析仅需<1000万条reads。

快速 streamlined 流程：从RNA到富集m6A RNA的全程约2小时30分钟，其中手工操作时间<30分钟。

高度便捷：试剂盒包含EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集各步骤所需的全部组分，足以完成含m6A RNA序列的捕获，使CUT&RUN m6A RNA富集操作最便捷，结果可靠且一致。

背景知识：m6A RNA甲基化

N6-甲基腺苷（m6A）是真核生物RNA分子中最常见、最丰富的修饰。该修饰由甲基转移酶复合物METTL3催化，并由m6A RNA去甲基化酶FTO和ALKBH5移除，后者以α-酮戊二酸（α-KG）和Fe??依赖的方式催化去甲基化。

METTL3、FTO和ALKBH5在从发育、代谢到生育力等众多生物过程中发挥重要作用。m6A占所有RNA碱基甲基化的80%以上，存在于多种物种中，主要分布于mRNA，也存在于tRNA、rRNA、snRNA等非编码RNA中。

mRNA转录本中m6A的相对丰度影响RNA代谢过程，包括剪接、核输出、翻译能力与稳定性以及RNA转录。m6A甲基化酶和去甲基化酶缺陷导致的异常m6A水平可引发RNA功能障碍和疾病。例如，FTO突变患者中FTO活性增加导致靶mRNA中m6A水平异常降低，通过尚未明确的途径促进肥胖及相关疾病的发生。RNA上动态可逆的m6A修饰也可能作为一种具有深远生物学意义的新型表观遗传标志物。

检测原理与流程

试剂盒包含从总RNA开始成功完成m6A RNA富集所需的全部试剂。反应中，目标m6A区域两端的RNA序列被切割/去除，含m6A的目标片段通过结合在磁珠上的m6A捕获抗体被拉下。富集的RNA随后被释放、纯化并洗脱。试剂盒包含非免疫IgG对照和m6A阳性对照，可用于验证试剂盒效能及富集RNA定量或生物分析仪步骤的表现。

CUT&RUN（靶向切割与核酸酶释放）技术是相较于传统ChIP方法的进步，所需起始材料更少，定位分辨率显著提高。EpiQuik CUT&RUN m6A RNA富集试剂盒将CUT&RUN的优势与最快速的流程结合，可从低起始量RNA中可靠富集含m6A修饰的RNA片段，非特异性背景极低。

样本要求

输入材料：RNA，可从任何物种及各种组织或细胞样本中分离，如培养细胞、新鲜及冷冻组织、石蜡包埋组织、血液、体液样本等。

每次反应总RNA量：1 ug–20 ug。最佳起始量为10 ug RNA，但使用该试剂盒可从低至500 ng总RNA中获得数据。

应用领域

该试剂盒适用于m6A区域特异性鉴定、全转录组m6A图谱分析、表观转录组学研究，以及m6A修饰与疾病机制探索。富集的RNA特别适合快速构建非条形码（单重）和条形码（多重）文库，实现低偏倚、高分辨率的m6A区域定位。

产品引用文献

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