产品概述
由艾美捷代理Epigentek推出的EpiQuik? m6A RNA甲基化定量检测试剂盒(比色法)(货号:P-9005)是一套完整的优化缓冲液与试剂组合,用于比色法定量检测RNA中的N6-甲基腺苷(m6A或6mA)。该试剂盒适用于直接检测来自任何物种(哺乳动物、植物、真菌、细菌、病毒等)总RNA的m6A甲基化状态。
核心功能优势
快速便捷:采用类ELISA的比色检测法,使用m6A抗体,步骤简单易操作,整个检测流程可在3小时45分钟内完成。
高灵敏度:检测限低至10 pg m6A,能够准确捕捉微量样本中的甲基化信号。
独特结合液设计:专属结合液可使长度>70 nts的RNA紧密结合至孔板,从而实现对mRNA及非编码RNA(如tRNA、rRNA、snRNA)中m6A的定量检测。
高特异性:优化的抗体与增强液体系对m6A具有高度特异性,在样本RNA浓度范围内与未甲基化腺苷无交叉反应。
通用对照体系:试剂盒包含通用阳性与阴性对照,适用于任何物种的m6A定量。
灵活通量:可拆卸条孔微孔板格式,支持手动操作或高通量分析,灵活适配不同实验规模。
背景知识:m6A RNA甲基化
N6-甲基腺苷(m6A)是真核生物RNA分子中最常见、最丰富的修饰。该修饰由甲基转移酶复合物METTL3催化,并由新发现的m6A RNA去甲基化酶FTO和ALKBH5移除,后者以α-酮戊二酸(α-KG)和Fe??依赖的方式催化m6A去甲基化。
METTL3、FTO和ALKBH5在从发育、代谢到生育力等众多生物过程中发挥重要作用。m6A占所有RNA碱基甲基化的80%以上,存在于多种物种中,主要分布于mRNA,也存在于tRNA、rRNA、snRNA等非编码RNA中。
mRNA转录本中m6A的相对丰度影响RNA代谢过程,包括剪接、核输出、翻译能力与稳定性以及RNA转录。m6A RNA甲基化酶和去甲基化酶缺陷导致的异常m6A甲基化水平可引发RNA功能障碍和疾病。例如,FTO突变患者中FTO活性增加导致靶mRNA中m6A水平异常降低,通过尚未明确的途径促进肥胖及相关疾病的发生。RNA中动态可逆的m6A化学修饰也可能作为一种具有深远生物学意义的新型表观遗传标志物。
检测原理与流程
本检测中,总RNA通过RNA高结合液结合至条孔板。使用特异性捕获N6-甲基腺苷抗体和检测抗体检测m6A。检测信号经增强后,在450 nm波长下用微孔板分光光度计读取吸光度进行比色定量。m6A量与测得的OD强度成正比。
试剂盒提供阴性及阳性RNA对照。可绘制标准曲线(范围:0.02–1 ng m6A),或使用单一m6A量作为阳性对照。由于m6A含量因组织、正常与疾病状态、处理与未处理条件而异,建议设置重复样本以确保信号可靠。该试剂盒可定量m6A的绝对量,并确定两个不同RNA样本的相对m6A甲基化状态。
样本要求
输入材料:RNA,可从各种组织或细胞样本中分离,如培养细胞、新鲜及冷冻组织、石蜡包埋组织、血液、体液样本等。
每次检测RNA量:100 ng–300 ng。最佳定量输入量为200 ng,因为m6A丰度通常低于总RNA的0.1%。
产品规格
项目 | 详情
输入类型 | RNA
研究领域 | RNA甲基化
靶应用 | 量定量
板格式 | 96孔板
保证 | 6个月
运输与储存
试剂盒分两部分运输:第一部分常温,第二部分4°C冷冻冰袋。收到后:
1. NC、PC、DA、ES:-20°C避光储存
2. WB、CA、DS、8孔检测条:4°C避光储存
3. BS、SS:室温避光储存
注意:使用前检查洗涤缓冲液WB是否有盐沉淀。如有,室温或37°C加温并摇晃至盐重新溶解。所有组分在正确储存条件下自运输之日起稳定6个月。
产品引用文献
Huang B et. al. (September 2026). Kaempferol attenuates type 2 diabetic osteoporosis via METTL3/YTHDF2-regulated PTEN m?A methylation and ferritinophagy-ferroptosis inhibition. Pharmacol Res. 233:108473. PubMed: 42759588
De Jesus DF et. al. (September 2026). mA mRNA methylation regulates pancreatic α-cell plasticity. Nat Metab. PubMed: 42760315
Wang Z et. al. (September 2026). TET2 promotes monocyte inflammatory activation in asthma via ALKBH5-m6A regulation and PI3K signaling: evidence from m6A-SNP and single-cell analyses. Mol Genet Genomics. 301(1) PubMed: 42714648
Zheng C et. al. (September 2026). The m6A reader IGF2BP2 promotes proinflammatory signaling in Lupus nephritis by recognizing STAT1 m6A modifications. Autoimmunity. 59(1):2724058. PubMed: 42691090
Li Y et. al. (August 2026). WTAP-mediated m6A RNA methylation promotes diabetic foot ulcer healing under negative pressure wound therapy. J Diabetes Investig. PubMed: 42669871

微信扫码在线客服