8-硝基鸟嘌呤(8-NG)是一种由活性氮种类(RNS)引起的突变性DNA/RNA损伤。作为一种修饰的核苷酸碱基,8-NG因其含量丰富以及在DNA复制时通过G到T的转换突变所表现出的突变潜力而被认为很重要。8-NG还通过引起DNA断裂形成单链DNA参与基因激活/抑制的表观遗传调控。此外,研究表明,8-NG浓度的增加与多种炎症相关疾病(包括癌症)在病理上有联系。比较尿液/血清中的8-NG检测主要反映了全身亚硝化损伤与修复速率之间的平衡。然而,直接定量正常/疾病状态下不同细胞/组织中的8-NG含量可以识别DNA/RNA的组织特异性亚硝化损伤。因此,这种方法提供了更有用的信息,以更好地理解亚硝化损伤与疾病之间的关系,从而有助于疾病的诊断和治疗。
EpiQuik?亚硝化(8-硝基鸟嘌呤)DNA/RNA损伤定量检测试剂盒(比色法)是一套完整的优化缓冲液和试剂套装,用于直接比色检测和定量从任何物种(如哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒)分离的DNA/RNA的亚硝化DNA/RNA损伤(8-硝基鸟嘌呤,8-NG)状态,形式包括但不限于培养细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织和体液样本。
艾美捷Epigentek-EpiQuik亚硝化(8-硝基鸟嘌呤)DNA/RNA损伤定量试剂盒(比色法)(#P-6009-48)具有以下优势:
比色法检测,操作步骤简单方便,快速高效。整个过程可在3小时内完成。
高灵敏度,检测下限低至2皮克的8-NG。
高特异性,在样本DNA的指示浓度范围内仅检测8-NG,不与其他物质如8-OhG、8-OHdG、dG、鸟嘌呤发生交叉反应。
直接检测完整的DNA或RNA中的8-NG,消除了高分子化合物(如碳水化合物和蛋白质)的干扰,这些干扰在竞争性8-NG检测中经常出现。
检测水平与高效液相色谱(HPLC)或液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析高度相关且接近。
高度便捷的检测方法,直接使用从细胞或组织中分离的DNA或RNA,无需DNA/RNA消化或水解。
包含适用于任何物种的通用阳性和阴性对照,用于定量8-NG。
条带式微孔板格式,适用于手动或高通量分析,使检测更加灵活。
检测条件简单、可靠且一致。
原理与操作:
该试剂盒包含用于定量氧化RNA损伤(8-OhG)所需的所有试剂。在该检测中,RNA被结合到经过特殊处理以具有高RNA亲和力的条带孔中。通过捕获和检测抗体检测8-OhG。检测到的信号被增强,然后通过在微孔板分光光度计中读取吸光度进行比色定量。8-OhG的量与测量的吸光度强度成正比。
左图:EpiQuik? 8-OhG RNA损伤定量检测试剂盒(比色法)示意图
右图:将不同浓度的8-OhG标准对照品加入检测孔中,然后使用EpiQuik? 8-OhG RNA损伤定量检测试剂盒(比色法)进行测量。
起始材料与输入量:
所需的输入材料是RNA,可以从各种组织或细胞样本中分离,例如培养瓶或微孔板中的细胞、新鲜和冷冻组织、石蜡包埋组织、血液、体液样本等。每次检测所需的RNA量为100纳克至300纳克。为了最佳定量,输入RNA量应为300纳克,因为基础8-OhG通常少于总RNA的0.01%。
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