Epigenase APOBEC 3胞苷脱氨酶活性/抑制测定试剂盒，操作步骤简单，4小时内完成

APOBEC3胞嘧啶脱氨酶（载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽3）是一个DNA/RNA编辑家族，包含7个亚型：APOBEC3A、APOBEC3B、APOBEC3C、APOBEC3E、APOBEC3F、APOBEC3G和APOBEC3H。APOBEC3仅存在于哺乳动物中，能够催化单链DNA或RNA中胞嘧啶（C）碱基的氨基去除，形成尿嘧啶（U）。APOBEC3引起的遗传改变会改变转录和mRNA处理过程，并积极参与多种生物学过程。APOBEC3是先天免疫系统的一部分，能够抵御各种DNA或RNA病毒，保护细胞的完整性。通过促进单链DNA/RNA中胞嘧啶脱氨基为尿嘧啶，APOBEC3在病毒基因组中产生突变，从而抑制病毒复制。例如，有报道称APOBEC3在SARS-CoV-2基因组中引起的C到U突变是主导突变（>50%）。尽管APOBEC3赋予宿主对包括SARS-CoV-2在内的多种病毒的内在抗感染能力，但它也可能对病毒的进化产生潜在影响。APOBEC3在癌症中的DNA突变中贡献显著。作为癌症进化的主要驱动力之一，APOBEC3蛋白是多种肿瘤中检测到的基因组突变的主要原因之一。超过50%的癌症中可以观察到APOBEC3突变特征，这些特征促进了肿瘤的多样性，进一步推动疾病进展和对治疗的耐药性。

Epigenase APOBEC3胞嘧啶脱氨酶活性/抑制检测试剂盒是一套完整的优化缓冲液和试剂，用于测量来自人类和其他哺乳动物的细胞提取物或纯化的APOBEC3亚型（A3A、A3B、A3C、A3D、A3F和A3H）的总APOBEC3酶活性或抑制情况，适用于多种形式的样本，包括但不限于培养细胞和新鲜/冷冻组织。

艾美捷Epigentek-Epigenase APOBEC 3胞苷脱氨酶活性/抑制测定试剂盒（#P-3140-96）具有以下优势：

比色法检测：操作步骤简单，可在4小时内完成。  

直接测量总APOBEC3活性：通过简单检测APOBEC3转化的终产物来直接测量总APOBEC3活性。  

创新的试剂盒组成：背景信号极低，使检测过程简单、准确、可靠且一致。  

适用于细胞/组织提取物和纯化APOBEC3酶：可用于检测APOBEC3抑制剂在体内和体外的效果。  

高灵敏度：检测限低至10 ng纯化的APOBEC3酶。  

包含C到U转化标准品：用于定量APOBEC3的比活性。  

条板微孔板格式：支持手动或高通量分析。

原理与流程：

在此实验中，底物预先涂覆在微孔板孔中。活性APOBEC3酶结合到底物上，并将胞嘧啶转化为尿嘧啶产物。APOBEC3转化的产物可以通过特异性探针识别。通过在微孔板光谱光度计上以450 nm波长读取吸光度，可以比色法测量与酶活性成正比的尿嘧啶产物的比例或量。APOBEC3酶的活性与测量到的光密度强度成正比。

左图：使用APOBEC检测标准生成的示例标准曲线。    

右图：使用重组APOBEC3A实现的APOBEC3活性。  

使用Epigenase APOBEC3胞嘧啶脱氨酶活性/抑制检测试剂盒进行实验，添加了不同浓度的重组人APOBEC3A酶。

起始材料与输入量：

每个实验所需的细胞提取物量为2 ug至30 ug，最佳范围为15-20 ug。纯化酶的用量为10 ng至1 ug，具体取决于酶的类型、纯度和催化活性。