EpiQuik?循环乙酰化组蛋白H3K9 ELISA试剂盒(比色法)是专为定量检测血浆和血清中的循环组蛋白H3K9ac而设计的。
艾美捷EpiQuik循环乙酰组蛋白 H3K9 ELISA试剂盒(比色法)(#P-3132-48)优势与特点:
1、快速高效的实验流程,可在2.5小时内完成。
2、高灵敏度和特异性。检测限低至0.5 ng/孔,在血浆/血清中指示量范围内的动态范围为1-20 ng/孔。仅识别H3K9ac,与未修饰的H3或其他同一赖氨酸位点的修饰物无交叉反应。
3、方便地包含对照用于H3K9ac的定量。
4、条带微孔板格式使实验灵活:可手动或高通量操作。
5、简单、可靠且一致的实验条件。
原理与操作流程:
EpiQuik?循环乙酰化组蛋白H3K9 ELISA试剂盒(比色法)是用于测量血浆或血清中总H3K9ac的。在使用该试剂盒的实验中,血浆/血清样本中乙酰化于K9的组蛋白H3蛋白被涂有抗H3K9ac抗体的条带孔捕获。捕获的H3K9ac蛋白随后可被检测抗体识别,并通过比色显色试剂进行显色。H3K9ac的比例与吸光强度成正比。通过与标准对照比较,可以定量H3K9ac的绝对量。
EpiQuik?循环乙酰化组蛋白H3K9 ELISA试剂盒(比色法)的示意图
工作缓冲液和溶液的准备:
a. 准备稀释的WB(1倍洗液):
48次检测试剂盒:将13毫升的WB(10倍洗液)加入117毫升的蒸馏水中,并将pH值调整至7.2-7.5。
96次检测试剂盒:将26毫升的WB(10倍洗液)加入234毫升的蒸馏水中,并将pH值调整至7.2-7.5。
此稀释的WB(1倍洗液)现在可以在4℃下保存长达六个月。
b. 准备稀释的DAb溶液:
用稀释的WB(1倍洗液)按1:1000的比例稀释DAb(即,将1微升的DAb加入1000微升的稀释WB中)。每个检测孔需要50微升的稀释DAb。
c. 准备稀释的标准对照:
建议的标准曲线制备方法:首先,通过将5微升的标准对照加入5微升的HAB(组蛋白检测缓冲液)中,稀释标准对照至50纳克/微升;再通过将1微升的标准对照加入19微升的HAB中,稀释至5纳克/微升。然后,利用5纳克/微升和50纳克/微升的稀释标准对照与HAB进一步配制出七种浓度,最终浓度分别为0.5、1、2、5、10、20和50纳克。
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