表观遗传激活或失活在许多重要人类疾病中起着关键作用,尤其是在癌症中。
表观遗传基因失活的主要机制是DNA甲基转移酶引起的基因组DNA中CpG岛的甲基化。组蛋白甲基转移酶(HMTs)通过染色质依赖的转录抑制或激活来控制或调节DNA甲基化。HMTs将1-3个甲基基团从S-腺苷-L-蛋氨酸转移到组蛋白的赖氨酸和精氨酸残基上。SETD2和NSD2是主要的组蛋白甲基转移酶,它们催化哺乳动物细胞中组蛋白H3在赖氨酸36(H3K36)上的三甲基化。JHDMs和JMJDs是主要的组蛋白去甲基化酶,它们能够使H3K36去甲基化。H3K36me3一直被视为转录抑制基因的标志性标记,它仅存在于启动子下游的5'区域。H3K36me3的水平也可以通过抑制或激活HMTs而改变。在血浆或血清中检测到的循环H3K36me3已被证明是许多不同疾病或病理变化(如癌症进展)的标志物。因此,检测循环H3K36me3能够为更好地理解基因激活和沉默的表观遗传调控、与组蛋白修饰相关的病理过程、疾病相关生物标志物的筛选以及开发针对组蛋白修饰的药物提供有用信息。
EpiQuik?循环三甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法)是一种方便的工具包,允许实验者从生物液体样本(如人类、小鼠或大鼠的血浆和血清)中特异性地检测循环三甲基组蛋白H3K36(H3K36me3)。
艾美捷EpiQuik循环三甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法)(#P-3130-48)优势与特点:
1、快速高效的实验流程,可在2.5小时内完成。
2、高灵敏度和特异性。检测限低至0.5 ng/孔,血浆/血清中指示量范围内的动态范围为1-20 ng/孔。仅识别H3K36me3,与未修饰的H3或其他同一赖氨酸位点的修饰物无交叉反应。
3、方便地包含对照用于H3K36me3的定量。
4、条带微孔板格式使实验灵活:可手动或高通量操作。
5、简单、可靠且一致的实验条件。
图:从HL-60细胞中使用EpiQuik?总组蛋白提取试剂盒(产品编号:OP0006)制备组蛋白提取物,并将其以不同浓度加入牛血浆中。随后利用EpiQuik?循环三甲基组蛋白H3K36 ELISA试剂盒(比色法)测定了H3K36me3的含量。
原理与操作流程:
本试剂盒用于测量血浆或血清中的总H3K36me3。在使用该试剂盒的实验中,血浆/血清样本中三甲基化于K36的组蛋白H3蛋白被涂有抗H3K36me3抗体的条带孔捕获。捕获的H3K36me3蛋白随后可被检测抗体识别,并通过比色显色试剂进行显色。H3K36me3的比例与吸光强度成正比。通过与标准对照比较,可以定量H3K36me3的绝对量。
起始材料:
起始材料应为血浆或血清。每次实验所需的血浆或血清量为10至40 ?l,最佳量为30 ?l。
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