表观遗传激活或抑制基因在许多重要人类疾病中起着关键作用,尤其是在癌症中。表观遗传基因失活的主要机制是由于DNA甲基化酶引起的基因组DNA中CpG岛的甲基化。组蛋白甲基转移酶(HMTs)通过染色质依赖的转录抑制或激活来控制或调节DNA甲基化。HMTs将1到3个甲基基团从S-腺苷-L-甲硫氨酸转移到组蛋白的赖氨酸和精氨酸残基上。NSD3是催化哺乳动物细胞中组蛋白H3在赖氨酸4(H3-K4)处二甲基化的主要组蛋白甲基转移酶,而LSD2和JARIDs是去甲基化H3K4的主要组蛋白去甲基化酶。H3K4me2被认为是一种高转录基因的标志性标记,它被专一地放置在启动子下游的5'端区域。H3K4me2也可以通过抑制或激活HMTs来改变。在血浆或血清中观察到并被证明是许多不同疾病或病理变化(如癌症进展)的标志物的循环组蛋白H3K4me2。因此,检测循环H3K4me2将为更好地理解基因激活和沉默的表观遗传调控、组蛋白修饰相关的病理过程、疾病相关生物标志物的筛选以及开发针对组蛋白修饰的药物提供有用信息。
EpiQuik?循环二甲基组蛋白H3K4 ELISA试剂盒(比色法)是一套方便的工具包,允许实验者从人类、小鼠或大鼠的血浆和血清等生物液体样本中特异性地测量循环二甲基组蛋白H3K4(H3K4me2)。
艾美捷EpiQuik循环二甲基组蛋白H3K4 ELISA试剂盒(比色法)(#P-3110-48)优势与特点:
快速高效:整个过程可在2.5小时内完成。
高灵敏度和特异性:检测限低至每孔0.5 ng,血浆/血清在1-20 ng/孔范围内具有动态范围。仅识别H3K4me2,与未修饰的H3或同一赖氨酸位点的其他修饰无交叉反应。
方便的对照:试剂盒中包含对照,用于定量H3K4me2。
灵活的条孔微孔板格式:可手动或高通量操作。
简单、可靠且一致的检测条件。
图:使用EpiQuik?总组蛋白提取试剂盒(编号:OP0006)从HL-60细胞中提取了组蛋白,并将其以不同浓度加入到牛血浆中。随后,采用EpiQuik?循环二甲基组蛋白H3K4 ELISA试剂盒(比色法)测定了H3K4me2的含量。
原理与流程:
本试剂盒旨在测量血浆或血清中的总H3K4me2。在检测中,血浆/血清样本中在K4位点二甲基化的组蛋白H3被固定在条孔中,条孔预先包被了抗H3K4me2抗体。捕获的H3K4me2蛋白可被检测抗体识别,并通过显色试剂进行检测。H3K4me2的比例与吸光度强度成正比。通过与标准对照比较,可以定量H3K4me2的绝对含量。
起始材料:
输入材料应为血浆或血清。每孔的血浆或血清用量为10–40 uL,最佳用量为30 uL。
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