MethylFlash 羟甲基化DNA 5-hmC定量试剂盒，独立检测、无5-mC交叉反应，精准区分

一、产品定位与核心用途

由艾美捷代理Epigentek推出的MethylFlash 羟甲基化DNA 5-hmC定量试剂盒（比色法）（货号 P-1036）是一款用于DNA甲基化研究领域的即用型比色检测试剂盒，核心功能是通过类似ELISA的微孔板格式，特异性测定全球DNA羟甲基化水平，即5-羟甲基胞嘧啶（5-hmC）的含量，且不与甲基胞嘧啶和未甲基化胞嘧啶发生交叉反应。该试剂盒以DNA为输入样本，采用96孔板格式，可在3小时45分钟内完成全部实验流程，兼容手动与高通量分析。

二、技术背景与检测原理

5-hmC是胞嘧啶的一种修饰形式，近年来在动物组织中被发现。其表观遗传学功能可能与其前体5-甲基胞嘧啶（5-mC）不同，目前仍有待深入探索。研究表明，5-hmC在基因开关调控中发挥重要作用。5-hmC的存在使得研究者不仅需要重新评估已有的DNA甲基化数据，还需确定5-hmC在健康与疾病状态人体组织中的相对分布与变化。

然而，目前常用的甲基化DNA分析方法，包括限制性内切酶消化、亚硫酸氢盐或MeDIP介导的MS-PCR及测序，均不适用于5-hmC检测，因为这些方法无法有效区分5-hmC与5-mC。MethylFlash技术采用独特流程，可定量全球DNA羟甲基化水平，并提供了一种经济有效的方法来区分5-hmC、5-mC和未甲基化胞嘧啶（C），使研究者能够重新评估DNA甲基化数据中的羟甲基化信息，并高效检测新样本中的DNA羟甲基化。

检测原理为：DNA结合于经特殊处理、具有高DNA亲和力的条孔中，羟甲基化DNA片段被捕获抗体和检测抗体识别，随后通过类似ELISA的显色反应，在450 nm波长下读取吸光度。羟甲基化DNA的量与OD值成正比，用户可依据试剂盒提供的公式计算两个样本的相对羟甲基化状态，或通过标准曲线对5-hmC进行绝对定量。

三、关键性能优势

1. 高特异性区分：可特异性检测5-hmC，不与甲基胞嘧啶和未甲基化胞嘧啶发生交叉反应，实现5-hmC的独立检测。

2. 高灵敏度：检测下限低至40 pg羟甲基化DNA，可接受低至50 ng的基因组DNA输入，动态范围为40 pg至20 ng。分析灵敏度约为HPLC的十倍（0.008% vs 0.08%）。

3. 快速便捷：全程3小时45分钟内完成，步骤清晰，即开即用。

4. 通用对照：包含通用阳性与阴性对照，适用于哺乳动物、植物、真菌、细菌及病毒等任何物种的羟甲基化DNA定量。

5. 灵活通量：条孔式微孔板设计支持手动或高通量分析。

6. 安全经济：无需DNA消化/变性、放射性、提取或色谱步骤，相比传统方法更具成本效益。

7. 配对使用：可与MethylFlash甲基化DNA定量试剂盒（比色法）配对，实现甲基化DNA与羟甲基化DNA的同步定量。

四、应用场景

该试剂盒适用于全球DNA羟甲基化水平检测、表观遗传学研究、5-hmC与5-mC的区分分析、疾病相关羟甲基化标志物筛选、药物处理后的羟甲基化变化评估以及跨物种羟甲基化比较分析。其与甲基化定量试剂盒的配对设计，尤其适合需要同时评估两种修饰的研究场景，也可用于重新评估已有甲基化数据中的羟甲基化贡献。

五、总结

MethylFlash 羟甲基化DNA 5-hmC定量试剂盒以高特异性区分、高灵敏度、快速便捷和通用对照为核心优势，为全球DNA羟甲基化研究提供了可靠且经济的解决方案。其40 pg的检测下限与对5-mC、5-hmC和C的精准区分能力，使其成为表观遗传学实验室中研究DNA羟甲基化的重要工具，尤其适合需要重新评估甲基化数据或探索5-hmC生物学功能的研究。

六、文献参考

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