生物素修饰 dNTP丨Jena Bioscience 生物素标记脱氧三磷酸核苷酸，非放射性核酸探针制备核心工具

Biotin-dATP是什么，核心用途是什么？

Biotin-dATP（生物素标记dATP）属于生物素修饰脱氧核苷三磷酸，是天然dATP的酶促底物类似物。生物素通过连接臂共价连接在腺嘌呤碱基上，可被DNA聚合酶掺入新合成的DNA/cDNA链，在核酸分子上引入生物素亲和标签。

依托生物素-链霉亲和素（Streptavidin）超强特异性亲和相互作用，标记后的DNA探针可实现检测、捕获与富集，是经典非放射性核酸标记方案，替代传统同位素标记，安全稳定、信号可控，广泛用于分子杂交、原位成像、DNA片段捕获、SNP分析、DNA断裂标记等研究场景。

标记产物的下游检测方式：使用HRP、碱性磷酸酶AP、荧光染料偶联的链霉亲和素显色成像；或链霉亲和素磁珠/琼脂糖微球，完成生物素标记DNA的固相捕获与纯化。

核心应用场景：缺口平移（Nick Translation）、引物延伸（Primer Extension，Klenow酶）、DNA末端修复标记，也可用于探针制备、FISH、TUNEL、SNP分型、Pull-down等实验。 原理关键点：连接臂（spacer）原子长度会直接影响聚合酶掺入效率与链霉亲和素对生物素的可及性，Jena Bioscience提供11原子、14原子两种不同长度连接臂的生物素化dCTP，搭配Biotin-14-dATP，供研究者根据酶体系、实验类型选型。

Biotin-14-dATP / Biotin-14-dCTP 用于 Hi-C 实验原理示意图（Jena 官方博客图）

Jena Bioscience三款生物素dNTP产品详解

1. Biotin-14-dATP（货号 NU-835-BIO14）

Biotin-14-dATP，生物素通过14原子连接臂连接在腺嘌呤N6位点，作为天然dATP替代物，酶促掺入DNA/cDNA。

·推荐应用：缺口平移（Nick Translation，DNAse I + DNA聚合酶I）、Klenow片段介导引物延伸；适合DNA探针、cDNA探针制备；也用于DNA断裂末端修复标记（Break-seq等基因组DSB检测）

·提示：该版本不推荐Taq酶PCR；PCR扩增标记请选用Jena Biotin-11-dATP（N7-deaza修饰版本）

·推荐比例：缺口平移实验，Biotin-14-dATP:dATP = 50%:50%，可根据目标标记密度微调

·产品规格：1.0–1.1 mM过滤除菌溶液，溶剂10 mM Tris-HCl，pH7.5±0.5；HPLC纯度≥95%；-20℃避光保存，反复冻融尽量避免

2. Biotin-11-dCTP（货号 NU-809-BIOX）

Biotin-11-dCTP，生物素搭载11原子连接臂，修饰于胞嘧啶C5位，作为dCTP类似物，可被DNA聚合酶整合进新链。

·推荐应用：FISH荧光原位杂交、SNP分析、缺口平移、TUNEL凋亡DNA片段标记；兼容PCR标记（Jena内部验证Taq酶可掺入）

·推荐比例：PCR与缺口平移体系，推荐Biotin-11-dCTP:dCTP = 50%:50%，平衡扩增效率与标记密度

·光谱特征：λmax 294 nm，摩尔消光系数ε=9.3 L·mmol??·cm??（Tris-HCl pH7.5）

·产品规格：1.0–1.1 mM过滤除菌液，pH7.5±0.5，HPLC纯度≥95%；另有高浓度5 mM版本（NU-809-BIOX-HC）适合大体积标记反应，节约试剂、降低稀释效应

3. Biotin-14-dCTP（货号 NU-956-BIO14）

Biotin-14-dCTP，14原子更长连接臂修饰胞嘧啶C5位。更长的spacer降低空间位阻，当DNA链高密度标记时，链霉亲和素更容易结合生物素标签。

·推荐应用：高密度生物素标记DNA探针、缺口平移、原位杂交探针制备；适合需要高标记密度、强信号的杂交实验

·产品特点：三乙胺盐形式；HPLC纯度≥95%；1.0–1.1 mM过滤溶液，-20℃储存，有效期自交付起12个月

·选型核心对比：连接臂长度选择逻辑

1. 11原子短连接臂（Biotin-11-dCTP）：空间紧凑，更适合PCR、SNP分型、TUNEL，聚合酶掺入效率优异；

2. 14原子长连接臂（Biotin-14-dATP / Biotin-14-dCTP）：降低空间位阻，链霉亲和素识别更高效，优先用于缺口平移、高标记密度探针、原位杂交。

为什么选择Jena Bioscience生物素标记dNTP

1. 底物性能经过酶学验证：每款产品均在对应聚合酶体系内完成内部测试，明确适用酶与实验类型，避免盲目踩坑；区分PCR / 缺口平移 / 引物延伸适用场景，产品说明标注清晰。

2. 高纯度，过滤除菌：HPLC纯度≥95%，30 kDa过滤去除聚合酶抑制性杂质，批次间稳定性好，减少标记背景。

3. 多连接臂版本，灵活选型：11/14原子spacer双系列，可平衡酶掺入效率和链霉亲和素结合可及性，满足低密度/高密度标记不同实验需求。

4. 两种浓度可选：常规1 mM工作液直接取用；高浓度5 mM版本适合大规模探针合成，减少反应体系体积稀释。

5. 安全无放射性：生物素标记方案，无需同位素防护、废物特殊处理，杂交、成像、捕获实验均可稳定保存探针。

适用研究方向

荧光原位杂交FISH、染色体涂染探针、Southern/Northern blot核酸探针、SNP分型检测、TUNEL细胞凋亡检测、DNA断裂捕获（DSB捕获、Break-seq）、DNA Pull-down、固相引物延伸、cDNA标记、微生物核酸检测探针开发。

使用注意事项

1. 标记比例需要预实验优化：过高比例生物素dNTP会抑制DNA聚合酶活性，降低产物长度；过低会导致信号偏弱。

2. 储存：-20℃避光保存，离心开盖；短期室温累计暴露不超过1周，避免反复冻融。

3. 区分酶适配性：Biotin-14-dATP不适合常规Taq PCR，PCR标记腺嘌呤位点请选用Jena Biotin-11-dATP。

4. 所有产品仅限实验室科研使用，不可用于临床诊断。

Jena Bioscience生物素标记dNTP系列：Biotin-14-dATP、Biotin-11-dCTP、Biotin-14-dCTP，不同长度连接臂，用于非放射性DNA探针制备。适配缺口平移、FISH、TUNEL、SNP分型、DNA断裂捕获。长连接臂降低空间位阻，高HPLC纯度，酶促掺入性能经过验证，替代同位素标记，安全稳定，是核酸标记与亲和捕获的经典分子工具。