ELISpot专用板子的选择指南：关乎ELISpot实验成败的关键细节

在 ELISpot 实验中，96 孔板常用的膜有两种：硝酸纤维素（NC）膜和聚偏二氟乙烯（PVDF）膜。NC膜板一经上市，大多数实验室便立即采用。后来PVDF膜的96孔板问世，研究者改用PVDF，因为PVDF膜提供了更大的膜表面积，从而增加了可以结合的捕获抗体的量，这一特性对于成功的ELISpot实验至关重要。

PVDF膜在高倍放大镜下类似海绵

Mabtech可提供两种类型的ELISpot培养板：MSIP和MAIPSWU 

1. MSIP--ELISpot培养板

MSIP培养板底部附有塑料保护垫，是用于保护实验中的PVDF膜，以及避免在操作过程中液体对PVDF膜的污染。MSIP培养板有透明（货号3654-TP-10）和白色（货号3654-WP-10）两种形式可供选择。这两种颜色的板子在ELISpot读板仪中呈现略有不同的外观，但并不会影响实验结果。MSIP板的一个关键特征是它在左上角有一个“切角”。MSIP板在使用过程中，有如下两点需要注意：

A. 向每个孔中加入20 ul乙醇（35%）。乙醇在孔中停留时间不超过1分钟。

B. 在终止显色时，用去离子水/自来水洗涤各实验孔前，小心地拆卸底部的保护垫（例如，使用钳子）。

2. MAIPSWU--ELISpot培养板

MAIPSWU培养板是白色形式(货号3654-EP-10)的。它没有底部保护垫，但是底部有一个可拆卸的托盘。MAIPSWU培养板的一个关键特点是它在顶部和底部的右上角有两个“切角”。MAIPSWU板在使用过程中，有如下两点需要注意：

A. 每孔中加入50?L 70%，乙醇在孔中停留的时间不超过2min。

B. 在洗涤步骤中，可以将培养板从托盘中取出，但在操作过程中要避免液体反渗入PVDF膜的背部和托盘中，从而导致PVDF膜的泄漏或污染。

经常会遇到客户纠结时选择白色板子还是透明的板子，其实这只是个人喜好的问题。白色和透明版在酶联免疫斑点读板仪上的外观略有不同，但对点位计数没有影响的。