脯氨酸是一种非必需氨基酸,可以从谷氨酸合成,用于蛋白质生物合成。脯氨酸缺乏一个-NH2氨基,而是含有一个在生物条件下质子化的仲胺(NH2+),而其羧基则处于去质子化状态。脯氨酸是一种甘氨酸受体以及NMDA和非NMDA(AMPA/海人酸)离子型谷氨酸受体的弱激动剂底物。在临床上,2022年的一项人类研究显示,高脯氨酸饮食与人类抑郁症的发病几率增加有关。在其他生物体中,结果也具有显著性。脯氨酸还在植物的繁殖组织(如花粉)中发挥作用。
Cell Biolabs的脯氨酸检测试剂盒是一种用于测定生物样本中脯氨酸水平的简单检测方法。脯氨酸水平可以在多种生物样本中进行定量,包括血清和血浆。该试剂盒的检测灵敏度为15.6 ?M脯氨酸。每套试剂盒提供足够的试剂,可进行多达100次检测*,包括标准曲线和未知样本。
*注意:每个样本重复需要2次检测,一次用吡咯啉-5-羧酸还原酶处理(+P5CR),一次不处理(-P5CR)。脯氨酸水平是通过比较2个孔在450 nm波长处的吸光度差值来计算的。
作为Cell Biolabs全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品脯氨酸检测试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
脯氨酸检测试剂盒 | MET-5196 | 查看 |
脯氨酸检测试剂盒检测原理:
脯氨酸检测试剂盒是一种灵敏的定量比色法检测脯氨酸的方法。P5CR酶将脯氨酸和NAD+转化为吡咯啉-5-羧酸和NADH。在含有WST-1和电子介体的比色探针混合液存在下,WST-1被转化为甲臜形式(见图1),并在450 nm处读取孔板的吸光度。通过与预先设定的脯氨酸标准曲线进行比较,确定未知样本中脯氨酸的含量。
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试剂盒组成(运输时使用蓝色冰袋)
1. L-脯氨酸标准品(部件编号51961C):1支50 ?L的100 mM溶液。
2. 10X检测缓冲液(部件编号51962A):1瓶30 mL溶液。
3. P5CR酶(部件编号51963B):1支200 ?L的棕色瓶装溶液。
4. NAD+(部件编号51964D):1支400 ?L溶液。
5. 10X比色探针(部件编号51946D):2支1 mL的棕色瓶装溶液。
未提供材料
1. 蒸馏水或去离子水
2. 标准96孔透明微孔板
3. 能够在450 nm处读取吸光度的分光光度微孔板读取仪
4. 10 kD截留分子量的离心过滤装置
储存条件
收到试剂盒后,将P5CR酶在4°C下保存。切勿冷冻P5CR酶。将10X检测缓冲液在室温下保存。其余组分需在-80°C下保存。避免多次冻融循环。比色探针和P5CR酶对光敏感,需妥善保存。
以下图表展示了典型的脯氨酸检测结果。以下数据仅供参考,不应用于解读实际检测结果。
文献参考:
1. Henzi V, Reichling DB, Helm SW, and MacDermott AB (1992). Molecular Pharmacology. 41:793–801
2. Arslan OE (2014). Neuroanatomical Basis of Clinical Neurology CRC Press. Page 309.
3. Verbruggen N and Hermans C (2008). Amino Acids. 35: 753–759.
4. Shrestha A, Fendel A, Nguyen TH, Adebabay A, Kullik AS, Benndorf J, Leon J, and Naz AA (2022). Plant, Cell & Environment. 45: 3523–3536.
5. Shrestha A, Cudjoe DK, Kamruzzaman M, Siddique S, Fiorani F, Léon J, and Naz AA (2021).Journal of Plant Physiology. 261: 153414
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