Cell Biolabs DAG(二酰基甘油)检测试剂盒，一种简单的荧光法测定方法

二酰基甘油（DAG）是许多细胞脂质生物合成的关键中间体，在生化信号传导中发挥着基础性作用。

从结构上看，二酰基甘油是一种甘油酯，由2条脂肪酸链通过中心的甘油骨架连接而成。二酰基甘油是许多脂质（例如，甘油三酯、磷脂）的前体；然而，DAG还作为一种第二信使信号脂质发挥作用，它是通过磷脂酶C水解PIP?产生的，能够引发细胞内Ca??的释放和蛋白激酶C（PKC）的激活。最终，PKC酶参与了许多对正常细胞生理的修饰，影响了数百种底物。

Cell Biolabs的DAG检测试剂盒通过耦联酶反应系统测量样本中的二酰基甘油含量。

首先，使用激酶对DAG样本进行磷酸化，生成磷酸肌醇。接下来，使用脂肪酶将磷酸肌醇水解为甘油-3-磷酸。最后，甘油-3-磷酸在甘油-3-磷酸氧化酶（GPO）的作用下被氧化，产生过氧化氢，过氧化氢与试剂盒中的荧光探针（激发波长530-560 nm/发射波长585-595 nm）发生反应。

DAG检测试剂盒是一种简单的荧光法测定方法，采用96孔微孔板格式定量测量细胞裂解液中的总DAG（二酰基甘油）。

每套试剂盒提供的试剂足以进行多达100次测定，包括空白、标准品和未知样本。试剂盒包含DAG标准品，检测灵敏度限约为15 ?M。

*注意：每个样本重复需要2次测定，一次加入激酶混合液（+Kin），一次不加（-Kin）。DAG的含量通过两个孔的荧光读数差异计算得出。

作为Cell Biolabs全国总代理，艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品DAG(二酰基甘油)检测试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

DAG(二酰基甘油)检测试剂盒组成（干冰运输）：

DAG标准品（部件号50281D）：一瓶1 mL的2 mM 1,2-二油酰-sn-甘油。

10X测定缓冲液（部件号50192D）：一瓶1.5 mL。

激酶混合液（部件号50282D）：两瓶1 mL，含有ATP。

脂肪酶溶液（部件号50193D）：三瓶1.4 mL。

酶混合液（部件号50194D）：三瓶1.75 mL。

荧光探针（部件号261901）：一瓶110 ?L的琥珀色瓶。

未提供材料：

标准96孔荧光黑色微孔板

含镁和钙的PBS

细胞脂质提取试剂（甲醇、氯仿、1M氯化钠）

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储存：

将整个试剂盒储存于-80℃。通过分装避免多次冻融。荧光探针对光敏感，应保存在琥珀色试管中。

文献参考：

1. Yang, C. and Kazanietz, M.G. (2003) Trends Pharmacol. Sci. 24, 602-608.

2. Brose, N. et al. (2004) Curr. Opin. Neurobiol. 14, 328-340.

3. Athenstaedt, K. and Daum, G. (1999) Eur. J. Biochem. 266, 1-16.

4. Kanoh, H. et al. (2002). J. Biochem. (Tokyo) 131, 629-633.

5. Corbalan-Garcia, S. and Gomez-Fernandez, J.C. (2006) Biochim. Biophys. Acta 1761, 633-654

6. Wang, Q.J. (2006). Trends Pharmacol. Sci. 27, 317-323.

Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈（San Diego），是有名的细胞学试剂品牌，作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商，为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的高端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。