基于人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的慢病毒载体已成为基因转移研究中极具前景的工具。慢病毒载体的优势在于其能够将基因转移到分裂和非分裂细胞中并实现整合。通过使用水疱性口炎病毒包膜G(VSV-G)蛋白进行假型包装,慢病毒载体的靶细胞范围得以显著扩展。研究表明,慢病毒载体能够将基因递送至神经元、淋巴细胞和巨噬细胞等细胞类型,而这些细胞类型是传统逆转录病毒载体无法使用的。此外,慢病毒载体已被证明在体内对大脑、肝脏、肌肉和视网膜进行基因转导时既有效又无毒性或免疫反应。近年来,慢病毒系统被广泛用于在体外和体内将小干扰RNA(siRNA)高效整合到多种细胞系和原代细胞中。
提供的GFP慢病毒对照是一种VSVG假型的泛嗜性病毒,能够感染分裂和非分裂细胞。该病毒含有绿色荧光蛋白,为转导提供了一个有用的对照工具。此外,这种对照病毒还可用于生成GFP稳定表达的细胞系,并可通过绿色荧光分选来选择稳定克隆。
作为Cell Biolabs全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品GFP慢病毒控制。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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GFP慢病毒控制 | LTV-300 | 查看 |
质量控制:
本管含有200 ?L的对照GFP上清液,其p24水平为100 ng/mL(颗粒滴度),这是通过p24 ELISA试剂盒(产品编号:VPK-108-HIV p24)测定的;同时,其感染滴度至少为1.0 × 10? TU/mL(感染性滴度),这是通过感染293细胞后绿色荧光检测得出的(见图)。
图:293细胞中的GFP表达:293细胞以每孔100,000个细胞的密度接种于6孔板中,过夜培养。细胞在含有8 ?g/mL聚凝胺(Polybrene)的条件下用GFP慢病毒进行感染,持续72小时。
安全注意事项
请记住,您将操作含有传染性病毒的样本。请遵循NIH推荐的针对所有含有BSL-2生物体的材料的指南。必须采取预防措施,避免直接接触病毒上清液。
文献参考:
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4. White S. M., Renda M., Nam N. Y., Klimatcheva E., Zhu Y., Fisk J., Halterman M., Rimel B. J.,Federoff H., Pandya S., Rosenblatt J. D., and V. Planelles (1999) J Virol. 73:2832-40.
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