血管新生(或称新生血管形成)是从现有血管延伸出新的血管的过程。主要参与的细胞是内皮细胞,它们衬附在所有血管内部,并构成了毛细血管的几乎全部结构。血管新生涉及多个步骤:为了形成新的血管,内皮细胞必须首先从其稳定的附着位置逃脱,通过突破基底膜来实现。一旦完成这一过程,内皮细胞会向血管新生刺激物(如肿瘤细胞或伤口相关巨噬细胞释放的物质)方向迁移。此外,内皮细胞还会增殖,以提供构建新血管所需的足够细胞数量。在增殖之后,新生成的内皮细胞需要重新组织成三维管状结构。这些环节——基底膜破坏、细胞迁移、细胞增殖和管状结构形成——都可以成为干预的靶点,并且可以在体外和体内进行测试。
作为Cell Biolabs全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Cell Biolabs热销产品内皮管形成试验(体外血管生成)。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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内皮管形成试验(体外血管生成) | CBA-200 | 查看 |
体内血管新生检测方法:
目前,已经开发出几种体内检测系统,包括鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)检测法、体内基质胶(Matrigel)栓检测法和角膜血管新生检测法,这些方法可以更真实地评估血管新生反应。然而,这些检测方法耗时、繁琐,并且需要专业的技术。
体外快速评估血管新生:
一种快速评估血管新生的方法是测量内皮细胞形成三维结构(管状结构)的能力。内皮细胞在胶原蛋白或纤维蛋白凝块包被的培养皿上经过几天后会形成管状结构。Cell Biolabs的内皮细胞管状结构形成试剂盒利用从Engelbreth–Holm–Swarm(EHS)肿瘤细胞中提取的细胞外基质(ECM)凝胶。在ECM凝胶上形成的内皮细胞管状结构能高度模拟体内环境,可用于在体内检测之前测试血管新生抑制剂。
Cell Biolabs的内皮细胞管状结构形成试剂盒提供了一个强大的体外血管新生评估系统。管状结构的形成可在18小时内完成。使用试剂盒提供的荧光染料对管状结构进行染色后,可以通过成像软件定量分析管状结构的形成程度,例如平均管长和分支点数量。每套试剂盒提供的试剂量足够在96孔板中进行多达50次检测。
试剂盒组成(干冰运输):
细胞外基质(ECM)凝胶溶液(部件编号10010):五支0.5 mL的即用型管。
10倍染色缓冲液(部件编号10011):一支1 mL的管。
染色染料(部件编号10012):一支50 ?L的管,含有1 mM的Calcein AM(溶于DMSO)。
未提供材料:
内皮细胞(如人脐静脉内皮细胞HUVEC、人微血管内皮细胞HMEC)。
内皮细胞培养基。
1倍PBS。
37℃培养箱,5% CO?环境。
光学显微镜。
荧光显微镜。
(可选)管状结构定量分析软件。
保存条件:
所有组分需在-20℃保存。
试剂准备:
ECM凝胶:在冰上或无霜4℃冰箱中过夜解冻,解冻后的ECM凝胶溶液可在4℃保存长达10天,不得再次冷冻。ECM凝胶溶液在室温下会迅速凝胶化,整个过程必须始终将管置于冰上。
1倍染色缓冲液:将提供的10倍浓缩液按1:10的比例用去离子水稀释,制备1倍染色缓冲液。稀释后的溶液可在室温保存。
1倍染色溶液:新鲜配制1倍染色缓冲液,将提供的染色染料稀释至1 ?M的浓度。1倍染色溶液可在室温保存。
结果示例:
下图显示了使用内皮管的HUVEC细胞的成管结果地层分析。以下数据仅供参考。此数据不应用于解读实际结果
Cell Biolabs公司位于美国加利福尼亚州南部重要的工业城市圣迭戈(San Diego),是有名的细胞学试剂品牌,作为前沿的细胞学分析检测试剂盒生产商,为生物技术和研究类客户提供好的基于细胞功能研究以及疾病等方面的高端产品和技术服务。产品主要涵盖细胞研究、细胞信号通路和蛋白质生物学、代谢研究、病原体和毒素、干细胞研究等领域。全球众多大学、政府研究机构、生物、制药企业的科研实验室均在使用Cell Biolabs的产品。
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