IgG(狗)ELISA试剂盒：用于测量犬生物样本中的IgG

IgG(狗)ELISA试剂盒是一种高度敏感的双位点酶联免疫吸附测定法（ELISA），用于测量犬生物样本中的IgG。如果ELISA用于预期用途之外，用户可能需要针对所述用途进行优化。

艾美捷IgG(狗)ELISA试剂盒：

货号：KA1938

校准范围：25至800纳克/毫升

适用样本：血浆、血清。

样本体积：100微升

标记：HRP偶联

检测方法：比色法

法规状态：仅限研究使用（RUO）

反应性：犬

应用：定量

储存说明：将试剂盒储存在4℃

仅限研究使用（RUO）

IgG(狗)ELISA试剂盒测定原理：

在此测定中，样本中的IgG与已吸附在聚苯乙烯微量滴定板孔表面的抗IgG抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的抗IgG抗体。这些酶标记的抗体与先前结合的IgG形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来测定与免疫吸附剂结合的酶。结合的酶的量与测试样本中IgG的浓度成正比；因此，450纳米处的吸光度是测试样本中IgG浓度的量度。可以通过从标准品构建的标准曲线上插值来确定测试样本中IgG的量，并校正样本稀释。

使用注意事项：

在使用本产品之前，请完整阅读本协议。

仅限研究使用，不用于诊断目的。不用于人类和动物食用。仅限体外实验室使用。

? 程序限制

当完全理解包装插页说明中的信息，并遵循良好的实验室实践时，将获得可靠和可重复的结果。可能影响测定性能的因素包括仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量以及试剂和样本移液、洗涤技术、孵育时间或温度的准确性。不要将不同批号或来源的试剂混合或替换。

试剂准备：

在使用前将所有试剂平衡至室温（16℃至25℃）。

? 稀释液浓缩液

提供的稀释液为5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1/5（1份缓冲液浓缩液，4份dH?O）。

? 洗涤液浓缩液

提供的洗涤液为20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水稀释1/20（1份缓冲液浓缩液，19份dH?O）。当储存温度较低时，浓缩液中可能会形成结晶。在稀释前将浓缩液加热至30-35℃可以溶解结晶。

? 酶-抗体偶联物

通过向每个测试条的1X稀释液中加入10微升酶-抗体偶联物来计算每个微量滴定板测试条所需的工作偶联液量（每个用于测试的测试条加入990微升）。立即稀释并使用，避免光照。均匀混合，但要轻柔。避免起泡。

? 预包被的ELISA微量滴定板

直接使用。打开铝箔袋并取出板。将不会用于测定的测试条和孔放回袋中，并与干燥剂一起重新密封。

? 犬IgG校准品

根据特定批次的分析证书进行准备。

结果计算：

从每个样本的测试值中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

平均每个标准的重复读数，并使用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来处理数据来构建标准曲线。也可以使用二阶多项式（二次）或其他曲线拟合；然而，它们对数据的拟合精度较低。

从标准曲线上插值测试样本值。校正血清稀释因子，以确定原始样本中IgG的浓度。

标准曲线仅用于说明，不应用于计算未知量。每次进行测定时，应生成标准曲线。