C5a受体的科研意义
HM1076为靶向小鼠C5a受体(C5aR,CD88)的单克隆抗体,克隆号20/70。C5a是补体C5裂解产生的过敏毒素,是强效炎症趋化因子,主要通过C5aR介导绝大多数生物学效应,在急性炎症应答启动环节发挥关键作用。C5aR属于视紫红质超家族七跨膜G蛋白偶联受体,分子量45 kDa。
C5aR广泛表达于多种免疫细胞,包括中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、树突状细胞与肥大细胞;同时血管内皮细胞、心肌细胞、支气管上皮细胞等非免疫细胞也可表达该受体。C5aR激活后触发胞内钙动员,激活PKB、PLD等下游信号通路。大量研究证实,C5aR高表达与类风湿关节炎,多发性硬化,动脉粥样硬化,炎症性肠病等炎症,自身免疫及神经退行性疾病密切相关。在体内实验中,阻断C5aR能够显著减轻炎症损伤。
由艾美捷代理Hycult推出的小鼠C5aR单克隆抗体(mAb 20/70)(货号:HM1076)可阻断C5a与其受体结合,适用于各类C5aR相关功能学研究。
抗体应用场景与实验方案
该抗体支持三大核心实验方向:流式细胞术、功能学实验、免疫荧光检测,配套标准化实验参考方案。 流式细胞实验:取2×105细胞,冰上使用人源及小鼠IgG封闭20分钟;加入10 ug 20/70抗体在PBS/1.5S体系染色45分钟,染色完成后PBS洗涤,1%甲醛固定,上机检测。 Transwell趋化功能实验:在诱导细胞向C5a迁移前,将2×105细胞与10 ug抗体预孵育30分钟,用于验证C5a/C5aR通路介导的细胞趋化效应。免疫荧光实验:细胞接种于盖玻片,4%多聚甲醛固定20分钟,3%BSA封闭2小时,抗体孵育2小时完成染色。
抗体稀释比例需要根据检测平台自行摸索,推荐起始稀释比例1:50;功能学体外实验需在自身实验体系中优化稀释条件。阳性对照推荐小鼠中性粒细胞,阴性对照为HEK293细胞。
产品规格与储存条件
产品类型为单克隆抗体,提供20 ug、100 ug两种规格。抗体经Protein G纯化,剂型为0.2 mL PBS溶液(浓度100 ug/mL),含0.1% BSA。免疫原是表面表达小鼠C5aR的RBL-2H3转染细胞,亚型为大鼠IgG2b,靶标物种为小鼠,别名C5a anaphylatoxin chemotactic receptor 1,基因名C5ar1。产品4℃保存,在推荐储存条件下有效期可达1年,稳定性满足长期课题使用。适用研究领域包含感染性疾病,肾病,神经系统疾病。
总结
HM1076(20/70克隆)小鼠C5aR单克隆抗体兼具标记检测与受体阻断双重能力,可同时满足流式,免疫荧光定位以及体外功能阻断实验。产品经过Protein G纯化,性能稳定,为补体C5a-C5aR炎症通路,自身免疫病,肾病及神经炎症机制研究提供可靠的工具抗体,助力科研人员开展细胞趋化,受体表达定位等相关实验。
本品仅限科研用途,不可用于人或动物体内实验以及临床诊断。

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