一、产品概述
由艾美捷代理Enzo推出的CYTO-ID 自噬检测试剂盒 2.0(货号 ENZ-KIT175)是一款更亮、更耐光、无需转染的定量检测试剂盒,用于监测活细胞中的自噬。该试剂盒通过特异性染料选择性标记积累的自噬囊泡,可测量自噬泡并在溶酶体被抑制的活细胞中监测自噬流。
二、作用机制
该探针是一种阳离子两亲性示踪剂(CAT)染料,能够以类似诱导磷脂沉积症药物的方式快速进入细胞。通过对染料上可滴定功能基团的精心选择,可防止其在溶酶体内积累,同时实现对自噬通路相关囊泡的标记。该 488nm 可激发的绿色染料经过优化,对溶酶体的染色极小,但在掺入前自噬体、自噬体和自噬溶酶体(自噬溶酶体)后会发出明亮荧光。
三、生物学背景
自噬是一种应激诱导的保护机制。在基础条件下活性较低,当细胞遭遇营养耗竭、化学或环境应激等不利条件时,真核细胞通过溶酶体介导的细胞内容物批量降解来启动该机制。自噬活性增强在癌症、神经退行性疾病、心血管疾病和糖尿病病理中的作用已被广泛认可并成为研究热点。如果溶酶体功能被抑制,自噬囊泡的清除受阻,自噬流的诱导可通过自噬囊泡积累的增强而被可视化。
四、产品优势
1. 更亮、更耐光:特异性染料标记自噬囊泡,荧光信号强且光稳定性好。
2. 快速简便:无需转染,操作流程简单快捷。
3. 低背景:对溶酶体染色极小,显著降低其他染料常见的背景干扰。
4. 高通量兼容:适用于自噬激活剂和抑制剂的高通量筛选。
5. 广泛引用:产品被大量文献引用,可靠性得到验证。
6. 多平台适用:支持荧光显微镜、流式细胞术和微孔板检测。
五、产品组成
CYTO-ID Green Detection Reagent 2
Hoechst 33342 核染料
自噬诱导剂(雷帕霉素)
氯喹对照
10X 检测缓冲液
六、质量控制
显微镜检测:当 CYTO-ID Green 自噬检测试剂 2 掺入细胞后,荧光探针的积累通常观察于细胞核周区域的球形囊泡中、分布于整个细胞质的焦点中,或两者兼有,具体取决于所研究的细胞类型。与按照用户手册制备的自噬样品相比,未诱导细胞显示出极低的背景染色。
七、规格选择
0200 规格:200 次流式细胞术检测、250 次显微镜检测或 3×96 孔微孔板检测。
0050 规格:50 次流式细胞术检测、60 次显微镜检测或 1×96 孔微孔板检测。
八、应用方向
流式细胞术
荧光显微镜
荧光检测
高通量筛选(HTS)
九、储存与操作
避光保存,避免反复冻融。
短期储存:-20°C;长期储存:-80°C。
蓝冰运输。
正确储存条件下,试剂盒组分自收到之日起稳定一年。
十、总结
CYTO-ID 自噬检测试剂盒 2.0 是一款更亮、更耐光、无需转染的活细胞自噬定量检测工具。其特异性染料对自噬囊泡的标记能力强、对溶酶体染色极小,支持荧光显微镜、流式细胞术和微孔板检测等多种平台,适用于自噬激活剂和抑制剂的高通量筛选,是癌症、神经退行性疾病、心血管疾病和糖尿病等研究领域的重要工具。
RUO – 仅供研究使用。

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