人IgG-Fc ELISA试剂盒，血清、血浆、尿液等一键适配

在免疫学研究和临床样本分析中，人免疫球蛋白G（IgG）是最主要的抗体类型，约占血清总抗体的75%。IgG不仅参与中和毒素、激活补体、调理吞噬和抗体依赖细胞介导的细胞毒性（ADCC）等关键免疫功能，其Fc段更是介导多种效应器功能的核心结构域。因此，特异性检测人IgG-Fc片段（而不受Fab片段干扰）对于疫苗免疫评价、自身抗体研究、血脑屏障通透性分析以及乳品中抗体含量测定等场景至关重要。

本文所介绍的Human IgG-Fc Sandwich ELISA 试剂盒（货号：E88-104）由艾美捷Bethyl Laboratories推出，该试剂盒提供了一种高灵敏度、宽检测范围且操作简便的定量方案，适用于血清、血浆、脑脊液（CSF）、乳汁及尿液等多种生物基质。以下从技术规格、检测原理、样本处理、操作流程及注意事项等方面进行功能性说明。

一、试剂盒核心参数

项目 | 具体指标

检测靶标 | Human IgG-Fc

反应性 | 人

应用平台 | ELISA

检测范围 | 0.69 500 ng/ml

适用样本类型 | 血清、血浆、脑脊液、乳汁、尿液

检测方法 | 生物素化-链霉亲和素-HRP（Biotin-Streptavidin-HRP）

实验类型 | Sandwich ELISA（双抗夹心法）

抗原种属 | 人

储存条件 | 2 8 °C

有效期 | 收货后6个月

试剂盒内含：人IgG-Fc预包被96孔板（1块）、人IgG标准品（500 ng/瓶，2瓶）、人IgG-Fc检测抗体（12 ml）、10×稀释缓冲液B（25 ml）、HRP溶液A（12 ml）、TMB底物（12 ml）、终止液（12 ml）、20×洗涤缓冲液（50 ml）以及密封板膜（6张）。所有组分均可在2~8°C冷藏保存，无需冷冻，随取随用。

二、检测原理与特异性优势

本试剂盒采用经典的双抗夹心-生物素亲和素放大系统：

1.捕获：96孔板内已预包被抗人IgG-Fc特异性抗体，能够识别样本中IgG分子的Fc段，而不与Fab片段或轻链发生交叉反应。

2.结合：加入样本或标准品后，样本中的人IgG-Fc被固定在板上的捕获抗体结合。

3.检测：加入检测抗体（同样针对IgG-Fc，且带有生物素标记），形成“捕获抗体—目标抗原—检测抗体”夹心复合物。

4.信号放大：加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）。由于每个链霉亲和素可结合多个生物素，信号得到显著放大。

5.显色：加入TMB底物，HRP催化其转化为蓝色产物，终止后变为黄色，在450 nm处读取吸光度。

关键特异性：试剂盒采用的抗体仅识别IgG分子的Fc部分，而非Fab或轻链。这意味着即使样本中存在游离的轻链、Fab降解片段或其他免疫球蛋白（IgA、IgM、IgD、IgE），也不会产生非特异性信号。这对于分析脑脊液、乳汁或反复冻融的血清样本尤其重要——这些样本中常存在部分降解的IgG片段，若使用通用型抗IgG抗体可能高估完整IgG含量，而本试剂盒只报告含有完整Fc段的IgG分子。

三、样本采集与处理建议

1. 血清

使用不含抗凝剂的采血管，室温凝集30分钟，1000×g离心15分钟，取上清。

短期（<24h）可2-8°C保存；长期请分装后-20°C或-80°C冻存，避免反复冻融。

2. 血浆

推荐使用EDTA或肝素抗凝管，采集后30分钟内离心（1000×g，15分钟），取上清。

枸橼酸钠抗凝血浆也可使用，但需注意抗凝剂比例。

3. 脑脊液（CSF）

一般无需稀释直接检测（因IgG浓度远低于血清）。若超出标准曲线上限，可用1×稀释缓冲液稀释2~5倍。

4. 乳汁

初乳或成熟乳含大量脂肪和酪蛋白。建议先4°C 2000×g离心15分钟，去除上层脂肪和沉淀，取中间澄清乳清层。根据预期浓度可稀释10~100倍。

5. 尿液

尿液IgG浓度较低，通常无需稀释即可上样。若尿液混浊，需离心（3000×g，10分钟）取上清。

通用稀释方法：所有样本均使用1×稀释缓冲液（将10×浓缩液用去离子水1:9稀释）进行稀释。建议进行预实验确定最佳稀释倍数，使OD值落在标准曲线中间段。

四、储存与稳定性

所有试剂盒组分均须储存于2-8°C，不可冷冻（预包被板若冻结会破坏抗体构象，导致信号下降）。按此条件，试剂盒自收货之日起6个月内保持性能稳定。已稀释的标准品建议当日使用，剩余废液不可重复冻存。TMB底物应避光保存，若出现明显蓝色则表明已污染，请更换新批次。