QA-Bio-α-（1-6）岩藻糖苷酶，确定核心岩藻糖化

去α-(1-6)岩藻糖苷酶能够从被荧光分子标记的核心GlcNAc上的非还原性、末端分支岩藻糖苷中去除岩藻糖，该结构是与荧光分子标记的GlcNAc-GlcNAc二糖结构α-(1-6)连接的。迄今为止，已证明ANTS、ANDSA和2-AA (LT-KAA-A2)这些荧光标签能与岩藻糖苷酶一起发挥作用。

未标记的寡糖不会被切割。例外的是，在没有任何报告分子的情况下，末端未分支的α-(1-3)或α-(1-4)岩藻糖会被切割。α-(1-6)岩藻糖苷酶对于确定核心岩藻糖化非常有用。

艾美捷QA-Bio-α-（1-6）岩藻糖苷酶：

货号：E-F006

来源：于在大肠杆菌中表达的重组Elizabethkingia meningosepticum。

EC：3.2.1.51

内容物：20 mM Tris-HCl，25 mM NaCl，(pH 7.5)中的α-(1-6)岩藻糖苷酶。

包含在20 μL和60 μL包装规格中：

200 μl 5倍反应缓冲液5.0 (250 mM 磷酸钠，pH 5.0)

比活性： >1.5 U/mg

活性 ：>1.0 U/ml

分子量： ~55,000 道尔顿

配方： 该酶作为20 mM Tris-HCl，25 mM NaCl pH 7.5中的无菌过滤溶液提供。

建议用法：

向管中加入高达1 nmole的标记寡糖。

加入去离子水至总计15 μl。

加入4 μl的5倍反应缓冲液5.0。

加入1 μl的α-(1-6)-岩藻糖苷酶。

在37?C下孵化3小时。

特异性： 当与报告分子共价连接到还原末端GlcNAc时，α-(1-6)连接的核心岩藻糖。唯一的例外是，在没有任何报告分子的情况下，末端未分支的α-(1-3)或α-(1-4)岩藻糖会被切割。已知支持切割的报告分子是氨基萘二磺酸和三磺酸以及2-氨基苯甲酸(2AA)。然而，2-氨基苯酰胺(2-AB)不会支持切割。像三甘露糖基二糖这样的较短寡糖比较长衍生物更完全地被消化，后者可能需要更长的孵化时间。

比活性测定 一个单位的岩藻糖苷酶活性定义为在37?C和pH 5.0条件下，1分钟内从4-甲基伞形酮基-α-L-岩藻糖苷中切割1 μmole的岩藻糖所需的酶量。

储存：将酶储存在4?C。

纯度 ：每批α-(1-6)岩藻糖苷酶都经过以下方式测试污染性蛋白酶：10μg的变性BSA与2 μL的酶一起孵化24小时。经过SDS-PAGE分析的BSA条带应无降解迹象。

生产宿主菌株经过广泛测试，不产生任何可检测的糖苷酶。

稳定性： 在适当储存的条件下至少稳定12个月。暴露在环境温度下几天不会降低活性。

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