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Epigentek:亚硫酸氢盐转化试剂盒、MS-qPCR试剂盒

发布者:艾美捷科技    发布时间:2025-07-01     
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DNA甲基化作为关键表观遗传标记,通过调控基因表达参与疾病发生发展。特定位点甲基化水平的精准检测具有以下核心价值:

1. 疾病早期诊断与分型

癌症:如结直肠癌中 EYA4、GRIA4 等基因甲基化谱可无创监测肿瘤负荷,非小细胞肺癌(NSCLC)中 STXBP6、BCL6B 等位点甲基化与生存率显著相关?

神经疾病:阿尔茨海默病中特定基因启动子高甲基化可作为风险标志物。

感染性疾病:结核病中 TSPAN4 基因甲基化位点(cg04552852/cg12464638)提供新型诊断分类器。

2. 治疗反应预测与预后评估

骨髓增生异常综合征(MDS)患者甲基化特征可预测阿扎胞苷疗效及生存期。

克罗恩病(CD)患者 TNF、DEFA5 基因CpG位点甲基化模式助力临床分型。

3. 表观遗传治疗靶点开发

甲基化异常的可逆性为药物研发提供方向(如DNMT抑制剂吉西他滨的应用)。

 

基因特定位点的甲基化水平检测是表观遗传学研究的关键环节,在疾病诊断、预后评估和机制探索中具有重要价值。Epigentek 的 P-1026(Bisulfite DNA Modification Kit)和 P-1028(Methylamp MS-qPCR Fast Kit)提供了一套高效、灵敏的解决方案,用于特定位点的甲基化定量分析。

P-1026.png

 

1. DNA提取:首先从组织样本中提取基因组DNA。

2. 亚硫酸氢盐处理:使用Epigentek 亚硫酸氢盐转化试剂盒(货号P-1026)对提取的DNA进行亚硫酸氢盐处理。该步骤将未甲基化的胞嘧啶(C)转化为尿嘧啶(U),而5-甲基胞嘧啶(5mC)保持不变,从而实现对甲基化状态的区分。

3. 甲基化特异性qPCR:使用Epigentek MS-qPCR试剂盒(货号P-1028)进行甲基化特异性定量PCR(qMS-PCR)。该方法利用荧光探针和引物,能够特异性识别甲基化DNA,并通过实时荧光信号检测其甲基化状态。

4. 数据分析:根据实验结果,计算甲基化百分比。公式为:

P-1028.png

其中,"meth" 表示甲基化DNA的荧光信号,"unmeth" 表示未甲基化DNA的荧光信号。整个流程依赖于亚硫酸氢盐处理和甲基化特异性qPCR技术,能够高效、灵敏地检测DNA甲基化状态。


经典文献案例解析:Trained immunity of alveolar macrophages enhances injury resolution via KLF4-MERTK-mediated efferocytosis(Chakraborty et al., J. Exp. Med., 2023)

alveolar.png

研究目标

技术方案

关键结果

解析KLF4基因甲基化对巨噬细胞凋亡清除功能的调控

1. 组织DNA提取

2. P-1026亚硫酸盐转化

3. P-1028 MS-qPCR检测KLF4启动子甲基化水平

KLF4启动子高甲基化抑制MERTK表达;

甲基化水平与肺泡损伤修复效率呈负相关(r=-0.82, P<0.001)

 KLF4.png 

该方案成功量化损伤模型中KLF4特定位点甲基化水平,揭示表观遗传重编程如何通过 KLF4-MERTK通路影响巨噬细胞功能,为急性肺损伤治疗提供新靶点。


Epigentek P-1026&P-1028提供 "转化-检测-定量"一体化解决方案,其标准化流程与文献验证可靠性(>200篇PubMed引用),使其成为特定位点甲基化定量研究的首选工具。其在疾病诊断(如 MGMT 甲基化)、机制研究(如 KLF4 调控)中表现卓越,操作简便且成本可控。相比传统技术,该组合兼具 qPCR 的灵敏度和亚硫酸盐处理的可靠性,是表观遗传学研究和临床转化的理想工具。未来,结合新兴技术(如纳米孔测序),可进一步提升多组学整合能力。

 


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