Biogradetech货号A-EXO010：血浆/血清外泌体蛋白质提取试剂盒（磁珠法）

外泌体（Exosome，Extracellular vesicles，EVs）是一类由细胞释放到细胞外的小型膜包裹囊泡。它们起源于细胞内部的多种细胞器，如内质网、高尔基体和细胞膜，并通过融合或分泌途径释放到细胞外。外泌体的大小通常在30到150纳米之间，具有丰富的蛋白质、核酸和脂质组成。

外泌体在细胞间的通讯和信号传递中起着重要作用。它们可以通过包裹和保护其内部的生物活性分子，如小RNA、mRNA、蛋白质和代谢产物，将这些分子传递到目标细胞。这种传递方式可以影响目标细胞的基因表达、蛋白质合成和细胞功能。因此，外泌体被认为是一种重要的细胞间通讯介质，参与了多种生理和病理过程，包括免疫调节、细胞增殖和凋亡、肿瘤转移和神经系统功能。

外泌体蛋白质在细胞生物学中具有重要的生物学意义。以下是外泌体蛋白质的几个主要生物学意义：

细胞间通讯：外泌体蛋白质可以通过外泌体的释放和摄取，在细胞间进行信息传递和通讯。外泌体中的蛋白质可以被目标细胞摄取，并调节目标细胞的功能和代谢。这种方式可以影响细胞的生理状态、细胞增殖和凋亡、细胞分化和细胞迁移等生物学过程。

信号调节：外泌体蛋白质可以作为信号分子，在细胞间传递信号并调节细胞的生理和病理过程。外泌体蛋白质可以通过与目标细胞的受体结合，激活特定信号通路，影响目标细胞的基因表达、细胞周期调控、细胞增殖和分化等过程。

免疫调节：外泌体蛋白质在免疫调节中起着重要作用。它们可以激活或抑制免疫细胞的功能，并调节免疫应答的强度和方向。外泌体蛋白质可以通过与免疫细胞表面的受体结合，影响免疫细胞的活化、分泌细胞因子和调节炎症反应等过程。

疾病诊断和治疗：外泌体蛋白质的组成和表达模式在不同疾病的发生和发展中发生变化，因此被广泛研究作为潜在的生物标志物用于疾病的诊断和治疗。通过分析外泌体中的特定蛋白质的表达水平或突变情况，可以识别出与疾病相关的特征，并为疾病的早期检测、分类和治疗提供重要信息。

总之，外泌体蛋白质在细胞间通讯、信号调节、免疫调节以及疾病诊断和治疗等方面具有重要的生物学意义。它们在细胞生物学和疾病研究中起着关键的调节和调控作用，为我们深入理解细胞功能和疾病机制提供了有价值的信息。

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本试剂盒基于自主研发的磁颗粒，能特异性捕获外泌体而不吸附杂质，实现高纯度、高回收率外泌体蛋白提取。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体蛋白提取。分离的外泌体蛋白可用于WB分析、ELISA检测和蛋白质谱分析等。

试剂盒组分：

自备仪器、试剂与耗材

高速冷冻离心机

侧摆摇床

1.5mL离心管

磁力架

1 x Loading Buffer

使用方法

1、样品预处理

1） 去除细胞。4℃，300g，离心 5min，转移上清到新的离心管；

对无细胞的样品，可以跳过此步骤。

2） 去除细胞及细胞碎片。4℃，2000g，离心 10min，转移上清到新的离心管；

3） 去除大体积颗粒。步骤 2）得到的上清，4℃，14000g，离心 30min，转移上清到新的离心管。

2、富集外泌体

1）取经预处理后的样品500μL（如果不足500μL，可用Solution A补足）到1.5mL离心管，加入10mg（加入量±10%均可）ExoMag Exosome Beads，固定在侧摆摇床上，17rpm，室温旋转孵育30min；

2）置于磁力架上，静置5s，弃上清；

3）加入1mL Solution A，上下颠倒混匀，置于磁力架，静置5s，弃上清；

4）重复上述步骤3）2次，保留磁颗粒；

3、外泌体蛋白提取

1）对于WB鉴定实验

a）向磁颗粒中，加入120μL 1 x Loading Buffer，涡旋振荡30s；煮沸5min；

b）置于磁力架上，静置5s，吸取上清，上清可直接用于WB鉴定。

2）对于蛋白组学实验

a）向磁颗粒中，加入500μL Lysis Buffer，涡旋振荡30s，冰上孵育30min；

b）置于磁力架上，静置5s，转移上清到新的1.5mL离心管，-80℃冰箱保存备用。

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Biogradetech是全球生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的领先供应商。他们提供广泛的产品组合，包括细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域的试剂。Biogradetech的产品受到全球生物研究机构和生物制药公司的高度追捧，他们以高质量、可靠性和服务而闻名。   

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