BPS Bioscience,CDH6 HEK293 细胞系：免疫治疗和药物开发的研究平台

CDH6 HEK293细胞系是一种稳定表达人类CDH6（Cadherin-6/K-cadherin）蛋白（BC000019.2）的HEK293细胞系。该细胞系是通过脂质介导的转染，随后使用潮霉素筛选和限制稀释法生成的。通过流式细胞仪筛选单个克隆的CDH6表达水平，并选择了一个高表达CDH6的克隆来生成这个细胞系。

背景

Cadherin-6/K-cadherin（CDH6）属于细胞粘附分子的钙粘蛋白超家族，是一种单次跨膜的类型1跨膜蛋白。在发育过程中，CDH6在神经嵴形态发生中发挥作用，对中枢神经系统和肾脏的分化至关重要。CDH6在多种来源的肿瘤细胞中表达水平较高，包括甲状腺、胃、卵巢和口腔鳞状细胞癌。由于CDH6和其他钙粘蛋白家族成员在癌症进展的许多阶段，包括肿瘤启动、生长和转移中的作用，它们是ADC（抗体药物偶联物）和CAR-T疗法中具有前景的免疫治疗靶标。

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品CDH6 HEK293 细胞系。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

应用

? 筛选针对CDH6的治疗性抗体和ADC（抗体药物偶联物）。

? 共培养实验筛选针对CDH6的CAR细胞。

细胞解冻

1. 在37°C水浴中摇晃装有冷冻细胞的小瓶大约60秒。细胞一旦解冻（可能比60秒稍快或稍慢），迅速将小瓶的全部内容转移到含有10毫升预温的解冻培养基1的试管中。如果将细胞在37°C的水浴中放置过久，将导致活性迅速丧失。

2. 立即以300 x g的速度离心细胞5分钟，去除培养基并用5毫升预温的解冻培养基1重悬细胞。

3. 将重悬的细胞转移到T25或T75培养瓶中，并在37°C和5% CO2培养箱中培养。

4. 培养24小时后，检查细胞附着和活性。更换培养基为新鲜的解冻培养基1，并继续在37°C和5% CO2培养箱中培养，直到细胞准备好传代。

5. 细胞应在完全融合前进行传代。在第一次传代和后续传代中，使用生长培养基1F。

细胞传代

1. 抽吸培养基，用无Ca2+/Mg2+的磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗细胞，并用0.05%胰酶/EDTA从培养容器中分离细胞。

2. 一旦细胞分离，加入生长培养基1F并转移到试管中。

3. 以300 x g的速度离心细胞5分钟，去除培养基并用生长培养基1F重悬细胞。

4. 按照推荐的1:6至1:8的传代比例，每周一次或两次将细胞种植到新的培养容器中。

细胞冷冻

1. 抽吸培养基，用无Ca2+/Mg2+的PBS冲洗细胞，并用0.05%胰酶/EDTA从培养容器中分离细胞。

2. 一旦细胞分离，加入生长培养基1F并计数细胞。

3. 以300 x g的速度离心细胞5分钟，去除培养基并在4°C的细胞冷冻培养基（BPS Bioscience #79796）中重悬细胞，细胞浓度约为2 x 10^6个细胞/毫升。

4. 将1毫升的细胞悬浮液分装到每个冷冻小瓶中。将小瓶放入保温容器中缓慢冷却，并在-80°C下过夜保存。

5. 次日将小瓶转移到液氮中保存。

注意：建议在早期传代时扩增细胞并至少冷冻10个小瓶以备将来使用。

图1：CDH6 HEK293细胞系中CDH6的表达。

对照亲本HEK293细胞（蓝色）或CDH6 HEK293细胞（绿色）用人类Cadherin-6/KCAD PE偶联抗体（R&D Systems #FAB2715P）染色，并通过流式细胞仪分析。Y轴是细胞数量百分比。X轴是PE的强度。

文献参考：

Bartolomé R., et al., 2021 Molecular Oncology. 15: 1849–1865.

Casal J., et al., 2019 Int. J. Mol. Sci. 20(13), 3373.

Pang L., et al., 2022 J Environ Pathol Toxicol Oncol. 41(1): 55-71.

Punovuori K., et al., 2021 Cell Mol Life Sci. 78(9): 4435-4450.

Suzuki H., et al., 2024 Mol Cancer Ther. 23 (3): 257–271.

Zhao Z., et al., 2021 Cancer Cell Int. 21: 493.

BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商，公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立，从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案，以推动新的药物发现。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等，主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 

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