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BPS Bioscience GPRC5D (狨猴)HEK293 细胞系,多发性骨髓瘤靶向研究

发布者:艾美捷科技    发布时间:2024-12-26     
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重组HEK293细胞表达狨猴(Macaca fascicularis)GPRC5D(孤儿G蛋白偶联受体,C类群5成员D,登录号XP_005570250.1),受CMV启动子控制。


背景

孤儿G蛋白偶联受体,C类群5成员D(GPRC5D)是一种视黄酸诱导蛋白,具有七个跨膜片段和一个短的N末端细胞外区域。GPRC5D在多发性骨髓瘤细胞中的强烈和选择性表达,与B细胞成熟抗原(BCMA)的表达模式相似,使其成为治疗多发性骨髓瘤的有希望的靶点。预计GPRC5D将成为多发性骨髓瘤免疫疗法中CAR T细胞的替代靶点。


作为BPS Bioscience在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品GPRC5D (狨猴)HEK293 细胞系产品仅用于科研,不可用于临床诊断。

产品名称货号详情

GPRC5D (狨猴)HEK293 细胞系

BPS-78346查看


应用

1. 狨猴GPRC5D结合实验;筛选GPRC5D配体和抗体。

2. 作为抗GPRC5D CAR-T开发的靶细胞。


细胞解冻

1. 在37°C水浴中摇晃装有冷冻细胞的小瓶大约60秒。细胞解冻后(可能比60秒稍快或稍慢),迅速将小瓶的全部内容转移到含有10 ml预热的解冻培养基1(不含潮霉素B)的试管中。在37°C水浴中放置细胞过久将导致活性迅速丧失。

2. 立即以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基并将细胞在5 ml预热的解冻培养基1(不含潮霉素B)中重悬。

3. 将重悬的细胞转移到T25或T75培养瓶中,并在37°C、5% CO2培养箱中培养。

4. 培养24小时后,检查细胞附着和活性。更换培养基为新鲜的解冻培养基1(不含潮霉素B),并继续在37°C、5% CO2培养箱中培养,直到细胞准备好传代。

5. 细胞应在完全融合前传代。在首次传代及后续传代中,使用生长培养基1C(含潮霉素B)。


细胞传代

1. 抽去培养基,用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗细胞,并用0.05% 胰酶/EDTA从培养容器中分离细胞。

2. 一旦细胞分离,加入生长培养基1C并转移到试管中。以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基并将细胞在含潮霉素B的生长培养基1C中重悬。按照每周1:5的期望亚培养比例将细胞种入新的培养容器中。


细胞冷冻

1. 抽去培养基,用磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗细胞,并用0.05% 胰酶/EDTA从培养容器中分离细胞。

2. 一旦细胞分离,加入生长培养基1C并计数细胞。

3. 以300 x g的速度离心细胞5分钟,去除培养基并将细胞在4°C冷冻培养基(BPS Bioscience #79796,或10% DMSO + 90% FBS)中重悬,细胞浓度约为2 x 10^6个细胞/ml。

4. 将1 ml的细胞悬浮液分装到每个冷冻小瓶中。将小瓶放入保温容器中缓慢冷却,并在-80°C下保存过夜。

5. 次日将小瓶转移到液氮中保存。

注意:建议在早期传代时扩增细胞并至少冷冻10个小瓶以备将来使用。

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图1. 利用流式细胞仪分析狨猴GPRC5D HEK293细胞系表面GPRC5D的表达。

狨猴GPRC5D HEK293细胞(蓝色)或对照HEK293细胞(绿色)使用GPRC5D APC偶联抗体(R&D Systems, #FAB6300A)染色,并通过流式细胞仪分析GPRC5D的表达。


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Products Catalog # Size

GPRC5D (Cynomolgus) CHO Cell Line 78338 2 vials

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BPS Bioscience是一家通过ISO 9001:2015认证的生命科学领域的供应商,公司一直致力于开发药物研发领域的重组蛋白酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选试剂盒和慢病毒等工具。公司由Henry Zhu博士于2005年创立,从创立至今一直致力于提供药物研发领域的创新解决方案,以推动新的药物发现。公司主要关注的领域包括免疫疗法、表观遗传学、新型冠状病毒、CRISPR、细胞信号转导等,主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶等。 


作为BPS Bioscience在中国的区域代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的BPS Bioscience以及客户订制化服务。


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