BPS Bioscience 转铁蛋白受体蛋白-1 (TFRC) HEK293 细胞系，研究转铁蛋白及其衍生物在细胞摄取实验中的内吞作用动力学

转铁蛋白受体蛋白-1（TFRC）是一种细胞表面受体，它以高亲和力结合血液中负载铁的转铁蛋白，以促进铁吸收到细胞中。因此，TFRC是人体铁供应链和总体稳态的组成部分。细胞内铁水平、缺氧和CRE信号调节TFRC转录。此外，TFRC与多种形式癌症的肿瘤进展阶段相关。在细胞水平上，铁过量会导致氧自由基形成和细胞功能障碍，而缺铁会导致细胞快速死亡。因此，铁水平失调与多种疾病状态相关，包括帕金森病、肌萎缩侧索硬化症（ALS）、亨廷顿氏病、多发性硬化症（MS）和肿瘤发生。

同样重要的是TFRC的潜在治疗用途。由于TFRC在肿瘤细胞表面上调，它已被靶向抑制成人T细胞白血病/淋巴瘤。此外，TFRC在神经系统疾病的治疗中发现了重要的效用。中枢神经系统（CNS）领域的药物发现历来受到血脑屏障（BBB）治疗方法有限的挑战。由于TFRC在血脑屏障内的脑毛细血管内皮细胞表面高度表达，因此正在开发药物递送策略，以利用TFRC结合实体从血液到中枢神经系统的转胞作用（即受体介导的转运，或RMT）。目前的方法包括包被TFRC配体转铁蛋白的聚乙二醇化脂质体，以及与携带治疗有效载荷的纳米颗粒（免疫脂质体）连接的抗TFRC抗体。

转铁蛋白受体蛋白-1（TFRC）HEK293细胞系是经过工程改造的HEK293细胞，可表达全长人类转铁蛋白受体蛋白-1（TFRC和TFR1，也称为人CD71蛋白，GenBank登录#NM_001128148），一种参与铁稳态的细胞表面受体。铁稳态失调与多种疾病，包括帕金森病、肌萎缩侧索硬化症（ALS）、亨廷顿氏病、，多发性硬化症（MS）和肿瘤发生。通过流式细胞术验证了该细胞系的表面表达TFRC可以用于多种应用，如转铁蛋白内吞作用研究和结合测定。

作为BPS Bioscience在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐BPS Bioscience热销产品转铁蛋白受体蛋白-1 (TFRC) HEK293 细胞系。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

应用

? 在细胞环境中筛选或进行针对人转铁蛋白受体-1设计的抗体的结合实验。

? 研究转铁蛋白及其衍生物在细胞摄取实验中的内吞作用动力学，以开发下一代培养基配方。

? 初步评估针对转铁蛋白受体的纳米颗粒复合物（免疫脂质体）的设计，这些复合物旨在通过跨细胞转运将治疗性有效载荷输送过血脑屏障（BBB）。

细胞培养协议

细胞解冻

1. 推荐将液氮中冷冻的细胞快速在37°C水浴中解冻，然后将整个小瓶内容物转移到含有10毫升解冻培养基1的试管中。

2. 离心细胞，去除上清液，并在5毫升预温的解冻培养基1中重悬细胞。

3. 将重悬的细胞转移到T25培养瓶中，并在37°C的5% CO2培养箱中培养。

4. 培养24小时后，额外添加约3毫升的解冻培养基1，并继续在37°C的CO2培养箱中培养，直到细胞准备好分裂。

5. 细胞应在完全融合前分裂。在第一次传代时，切换到生长培养基1C。

细胞传代

1. 要传代细胞，移除培养基，用磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗细胞，并用0.25%的胰蛋白酶/EDTA从培养容器中分离细胞。

2. 分离后，加入生长培养基1C，转移到试管中，离心细胞，重悬细胞于生长培养基1C中，并将适量的细胞悬浮液接种到新的培养容器中。次培养比例：每5天大约1:5。

细胞冷冻

1. 要冷冻细胞，移除培养基，用磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗细胞，并用0.25%的胰蛋白酶/EDTA从培养容器中分离细胞。

2. 分离后，加入解冻培养基1并计数细胞，然后转移到试管中，离心细胞，并在4°C的冷冻培养基（BPS Bioscience #79796）中重悬至约2 x 10^6细胞/毫升。

3. 将1毫升的细胞悬浮液分装到每个冷冻小瓶中。将小瓶放置在保温容器中缓慢冷却，并在-80°C下过夜保存。

4. 次日转移到液氮中保存。

数据展示：

图1。流式细胞术验证TFRC的表达。

使用PE偶联的抗人TFRC抗体（抗CD71，BioLegend#334106）的流式细胞术检测TFRC-HEK293重组细胞系（绿色）或亲本HEK293细胞（蓝色）。

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